祝贺东南大学等单位团队于《Analytical Chemistry》发表重要研究论文开创 CRISPR/Cas13a 介导的 circRNA 超灵敏检测新范式_企业动态_新闻中心

服务热线：13917250134「同微信」

您的位置：

产品中心

/ Products Classification 点击展开+

近日，东南大学化学化工学院、数字医学工程国家重点实验室马飞教授、张春阳教授团队联合山东师范大学刘军志教授等学者，在环形 RNA（circRNAs）检测技术领域取得突破性进展。相关研究成果以 “CRISPR/Cas13a trans-Cleavage-Driven Programmable Autonomous Synthesis of a Functional GQuadruplex for Ultrasensitive Detection of Circular RNAs with an Improved Signal-to-Background Ratio” 为题，正式发表于国际权威期刊《Analytical Chemistry》（2025 年，97 卷，20323−20332 页）。

该研究创新性地构建了 CRISPR/Cas13a 反式切割驱动的可编程自主合成功能 G - 四链体检测体系，实现了 circRNAs 的无逆转录、一步法、超灵敏定量分析，为 circRNA 相关分子诊断与临床转化研究提供了全新技术路径，有望推动肿瘤早期诊断等精准医学领域的发展。

基于 Cas13a 蛋白的新型 circRNA 检测体系构建

研究团队引入由上海惠诚生物科技有限公司（Huicheng Biotechnology Co. Ltd.）提供的 Leptotrichia buccalis 来源 Cas13a（LbuCas13a）蛋白，构建了高效特异的 RNA 检测平台。Cas13a 作为 VI 型 CRISPR/Cas 系统中独特的 RNA 靶向效应蛋白，具备序列可编程识别和高效反式切割双重特性。在该检测体系中，Cas13a 与特异性向导 RNA（crRNA）形成复合物，通过 crRNA 的间隔区与 circRNA 的反向剪接位点（BSJ）精准互补配对，实现对靶标 circRNA 的特异性识别。

Cas13a 激活后的级联信号放大机制

激活后的 Cas13a 展现出高效的分子操作能力，启动级联反应实现信号指数级放大：

1. 特异性识别与反式切割：Cas13a/crRNA 复合物识别靶标 circRNA 后激活反式切割活性，高效切割含尿嘧啶核糖核苷酸（rU）的底物探针，释放带有 2′,3′- 环磷酸基团的触发序列；

2. 触发序列修复与级联扩增：T4 多核苷酸激酶（T4 PNK）修复触发序列的 3′端结构，启动引物交换反应（PER）级联，通过 Bst DNA 聚合酶的链置换活性，自主合成大量不同长度的功能型 G - 四链体序列；

3. 高信噪比信号报告：荧光染料硫代黄素 T（ThT）与 G - 四链体特异性结合形成稳定复合物，释放强荧光信号，实现靶标 circRNA 的可视化定量。

该体系巧妙整合了 Cas13a 的高保真识别特性（单碱基分辨率）、PER 级联的高效扩增能力（信号放大倍数显著）以及 G - 四链体 / ThT 复合物的高信噪比优势，从识别、扩增到报告形成闭环，彻底解决了传统 circRNA 检测方法灵敏度低、背景高、操作复杂等难题。

技术突破与临床应用潜力

该检测技术展现出多项核心优势：

· 超灵敏检测：检测限低至 0.83 aM（10⁻¹⁸ M），较传统方法提升数个数量级；

· 高特异性：凭借 Cas13a 的精准识别和 crRNA 的可编程设计，可区分单碱基错配的 circRNA 变体，抗干扰能力强；

· 简便快速：37℃等温条件下一步法完成检测，全程仅需 40 分钟，无需复杂仪器；

· 广泛适用性：实现单细胞水平内源 circRNA profiling，成功区分乳腺癌组织与健康组织中 circRNA 表达差异，临床样本检测灵敏度和特异性均达 100%；

· 可扩展性强：通过修改 crRNA 的间隔区序列，可快速适配 circMTO1 等其他 circRNA，以及 lncRNA、miRNA 等多种 RNA 标志物检测。

上海惠诚生物技术支撑

作为该研究关键材料 LbuCas13a 蛋白的供应商，上海惠诚生物科技有限公司始终以 “惠质产品，挚诚服务” 为宗旨，为科研团队提供高品质的 CRISPR/Cas 工具蛋白及配套试剂。公司凭借完善的研发体系和生产布局，为国内基因编辑与分子诊断领域的创新研究提供了可靠的技术支撑，助力科研成果快速转化。

成果意义

该研究首次实现了 CRISPR/Cas13a 与 PER 级联反应的创新性整合，建立了无需逆转录、无标记、一步法的 circRNA 超灵敏检测技术，不仅填补了 circRNA 精准检测技术的空白，也为循环 RNA 标志物的临床应用提供了标准化解决方案。该技术在肿瘤早期筛查、个体化治疗监测、资源有限环境下的现场分子诊断等场景中具有重要应用价值，将有力推动精准医学检测技术的跨越式发展。

· 其他关键试剂包括 T4 多核苷酸激酶、Bst DNA 聚合酶（大片段）、dNTPs、ThT 荧光染料等，分别购自 New England Biolabs、Sigma-Aldrich 等知名供应商，确保实验结果的稳定性与可靠性。

Cas蛋白系列产品：

E-002 重组CRISPR-Cas12a蛋白(Lb) Crispr 核酸酶 Lbcas12a

E-003 CRISPR-Cas13a Lwcas13a

EH0506 LbuCas13a 核酸酶

祝贺澳门科技大学马文哲老师课题组在Virus Research(影响因子IF: 3.3033)发表论文

祝贺北京科技大学李正平老师课题组在Talanta (影响因子IF: 6.057)发表Crispe cas13a论文

祝贺南华大学邓仲良老师课题组在Frontiers in Microbiology(影响因子IF: 5.639)上发表论文

东南大学LbuCas13a 核酸酶发表论文

祝贺东南大学等单位团队于《Analytical Chemistry》发表重要研究论文开创 CRISPR/Cas13a 介导的 circRNA 超灵敏检测新范式

祝贺浙江大学等单位团队于《Chemical Engineering Journal》（IF: 15.1）发表重要研究论文

如需获取 LbuCas13a 核酸酶及相关 CRISPR-Cas 产品，或了解更多产品详情与技术支持，欢迎联系上海惠诚生物科技有限公司：