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祝贺北京科技大学李正平老师课题组在Talanta (影响因子IF: 6.057)发表论文


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对环状RNA (circRNA)进行快速、灵敏、特异的检测对生物学研究和临床诊断都具有重要意义。 由于大量对应的线性RNA共存,且除了环状RNA的连接序列外,其他序列都是相同的,对目标环状RNA的特异性识别现在面临着很大的挑战。在本文中,首先利用CRISPR/Cas13a特异性识别目标circRNA的唯一连接序列,并创新性地开发了CRISPR/Cas13a诱导指数扩增对circRNA的敏感性和特异性检测。 以一对互补的单链DNA和五个尿嘧啶核糖核苷酸作为3 '端悬臂,精心设计了一对茎环DNA引物。 一旦Cas13a识别到目标circRNA, Cas13a的反式切割活性就会被激活,尿嘧啶核糖核苷酸就会被切割。 因此,茎环引物的3 '端可以相互延伸,产生大量的双茎环dna,从而启动多重环介导等温扩增(multiple loop-mediated isothermal amplification, LAMP)。 利用Cas13a不断的切割活性和多重LAMP反应的高扩增效率,低至1fm的目标circRNA都能在30min内灵敏检测到。 本研究中的方法已成功应用于实际生物样品中circRNA的检测,无需分离相应的线性RNA。此外,该方法为所有序列特异性RNA目标的检测提供了一个通用平台,表明本研究中的CRISPR/Cas13a(cas13a由惠诚生物提供)诱导指数扩增方法在基础研究和临床诊断中都有很大的潜力用于RNA生物标志物的检测。 

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上海惠诚生物科技有限公司,成立于2010年,企业宗旨“惠质产品,挚诚服务”。惠诚生物致力于成为一站式科学服务商,产品覆盖设计开发过程,提供实验室设计、实验室建设、仪器设备、耗材、物资管理、试剂、技术服务等专项配套服务。惠诚生物在上海建立研发中心,在湖北和江苏有生产基地,在广州和深圳建立子公司,立足上海,销售网络遍布全国,为客户提供全方位的综合服务。


CRISPR是一种出色的基因组编辑工具,比较熟悉的是来自化脓链球菌的Cas9(SpCas9),不过这并不是唯一的选择。一种新型核酸酶Cas13a(以前称为C2c2)正开始进入人们的视野,它具有独特的性质,进一步扩展了CRISPR工具箱。


惠诚生物提供的提供的cas酶包括:

CRISPR-Cas13a

重组CRISPR-Cas12a蛋白 Recombinant CRISPR-Cas12a protein

重组CRISPR-Cas9蛋白 Recombinant CRISPR-Cas9 protein


更多产品请联系惠诚生物。

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