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Esp3I (BsmBI)限制性内切酶
Esp3I(BsmBI), ADCF
Esp3I(BsmBI), ADCF 经过基因工程重组、能够在 5~15 分钟内精确完成 DNA 切割，可识别 CGTCTC(1/5)^ 位点，适用于质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。Esp3I(BsmBI), ADCF 具有如下特点：5~15 分钟内即可完成酶切；良好的酶活冗余度，轻松应对底物过量或困难模板酶切。 上海惠诚生物提供的重组Esp3I (BsmBI)限制性内切酶不含动物源性相关组分。
Cat.No.: E21504H
产品名称：
英文名称：
规格:
2000 U (50 U/μl)
识别位点：5'...C G T C T C (N)1↓...3'3'...G C A G A G (N)5↑...5'
酶活性定义:
1 活性单位 (U) 是指在 50 μl 反应体系中，37°C 1 h 内完全酶切 1 µg λDNA 所需的酶量。
蛋白纯度：
本品经 SDS-PAGE 检测纯度 ≥95%。
内毒素：
本品内毒素残留< 10 EU/mg
最适反应温度:
37℃
失活条件：
80℃ 温育 20 min
反应时间：
可在 5~15 min 内完成反应
保存条件：
-20 ℃保存
用途:
质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。
使用方法:
DNA 快速酶切流程
① 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系：
a. DNA 底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐，否则将会影响 Esp3I, ADCF 酶活性；甲基化的 DNA 会抑制某些限制性内切酶酶切反应。
② 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴；
③ 37℃ 温育 15 min~1 h，一般推荐 5 U~10 U 酶 /μg DNA、10 U~20 U 酶 /μg 基因组 DNA，温浴 1 h，如需过夜酶切反应，请将酶量调整至 2.5 U；
④ 80℃ 温育 20 min 即可使酶失活，停止反应，或者通过吸附柱或苯酚 / 氯仿纯化终止反应；
⑤ 反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的 10%，避免酶中过多的甘油引起星号活性 ;
⑥ 限制性内切酶存储缓冲液中的添加剂 ( 例如甘油、盐 ) 与底物溶液中的污染物 ( 例如盐、EDTA 或乙醇等 ) 相同，反应体积越小，酶切反应抑制 效应越强；
⑦ 小体系推荐加样体系
不同 DNA 中的酶切位点数量:
甲基化修饰影响:
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