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国标GB 5009.168婴幼儿乳品中37种脂肪酸的测定

脂肪酸（fatty acid），是指一端含有一个羧基的长的脂肪族碳氢链，是最简单的一种脂，它是许多更复杂的脂的组成成分。脂肪酸在有充足氧供给的情况下，可氧化分解为CO2和H2O，释放大量能量，因此脂肪酸是机体主要能量来源之一。必需脂肪酸不仅为营养所必需，而且与儿童生长发育和成长健康有关，更有降血脂、防治冠心病等治疗作用，且与智力发育、记忆等生理功能有一定关系。一项新研究显示，在婴儿喝的婴儿奶粉中添加两种脂肪酸可能增加婴儿智慧，欧洲有些婴儿食品公司已把这两种脂肪酸掺在婴儿奶粉里。所以，检测婴幼儿乳品中的脂肪酸含量至关重要。

GLC 37脂肪酸甲酯混标应用于国标方法《GB 5009.168食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定》和《GB 5009.257 食品安全国家标准食品中反式脂肪酸的测定》。美国NU-CHEK公司作为全球领先的脂肪酸标准品供应商，生产出来的GLC 37中混合脂肪酸标样，广泛的应用于国标GB 5009.168和GB 5009.257分析方法中。上海惠诚生物作为美国NU-CHEK的代理商，价格优势，大量备有现货

实验参考步骤如下：

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

气相色谱-氢火焰离子化检测器（GC-FID）

试剂材料

甲醇为色谱纯；

无水碳酸钠、甲苯、乙酰氯均为分析纯；

脂肪酸缓和标准溶液（纯度99%）；

10%乙酰氯甲醇溶液：量取40 mL甲醇于100 mL干燥的烧杯中，准确吸取5 mL乙酰氯逐滴缓慢加入，不断搅拌，冷却至室温后转移并定容至50 mL干燥的容量瓶中；

6%碳酸钠溶液：称取6 g无水碳酸钠于100 mL烧杯中，加水溶解，转移并用水定容至100 mL容量瓶中。

样品制备

样品提取

称取样品0.5 g于15 mL干燥螺口玻璃管中，加入5 mL甲苯，作为待制备样液。

样液制备

向上述待制备样液中加入10%乙酰氯甲醇溶液6 mL，充氮气后，旋紧螺旋盖，振荡混合后于80℃±1℃水浴中放置2 h，期间每隔20 min取出振摇1次，水溶后取出冷却至室温。将反应后的样液转移至50 mL离心管中，分别用3 mL碳酸钠溶液清洗玻璃管3次，合并碳酸钠溶液于50 mL离心管中，混匀。5000 r/min离心5 min，取上清液作为试液，气相色谱仪测定。

实验条件

色谱条件

色谱柱：100%二氰基丙基聚硅氧烷色谱柱，100 m × 0.25 mm × 0.20 µm

载气：氮气；载气流量：1.0 mL/min；进样口温度：260℃

分流比：30︰1；检测器温度：280℃；进样量：1.0 μL

程序升温：初始温度100℃，持续13 min，以10℃/min速率升至180℃，保持6 min，再以1℃/min速率升至200℃，保持20 min，再以4℃/min速率升至230℃，保持10.5 min。

结果与讨论

实验结果

经图1、图2可知，采用100%二氰基丙基聚硅氧烷色谱柱检测婴幼儿配方乳品中的脂肪酸，峰形和分离度良好，保留时间稳定，且与杂质的分离度良好，能够满足检测要求。

图1 脂肪酸甲酯标准溶液色谱图

37种脂肪酸甲酯混标成分如下：

1.丁酸甲酯 2.己酸甲酯 3.辛酸甲酯 4. 葵酸甲酯 5.十一碳酸甲酯 6.月桂酸甲酯 7. 十三碳酸甲酯 8.肉豆蔻酸甲酯

9.肉豆蔻油酸甲脂 10.十五碳酸甲脂 11.十五碳一烯酸甲酯 12.棕榈酸甲酯 13.棕榈油酸甲酯 14.十七碳酸甲脂

15 .十七碳一烯酸甲酯 16. 硬脂酸甲酯 17.反式油酸甲酯 18 .油酸甲酯 19.反式亚油酸甲酯 20.亚油酸甲酯

21.花生酸甲酯 22.亚麻酸甲酯 23.二十碳一烯酸甲酯 24.α-亚麻酸甲酯 25.二十一碳酸甲酯 26.二十碳二烯酸甲酯

27.二十二碳酸甲酯 28.二十碳三烯酸甲酯 29.芥酸甲酯 30.二十碳三烯酸甲酯 31.花生四烯酸 ARA甲酯 32.二十三碳酸甲酯

33.二十二碳二烯酸甲酯 34. 二十四碳酸甲酯 35. 二十碳五烯酸EPA甲酯 36.二十四碳一烯酸甲酯 37.二十二碳六烯酸甲酯DHA）

图2 牛奶中的脂肪酸色谱图

结论

本实验依据GB 5009.168-2016第二法，用100%二氰基丙基聚硅氧烷色谱柱检测婴幼儿乳品中的脂肪酸，并结合气相色谱-氢火焰离子化检测器对样品进行了检测，结果脂肪酸保留时间稳定，峰形和分离度良好，且与样品中杂质分离效果较好，说明100%二氰基丙基聚硅氧烷色谱柱能够用于婴幼儿配方乳品中脂肪酸的检测。

附：相关产品

产品名称	规格描述	包装数量	订货号
100%二氰丙基聚硅氧烷气相色谱柱	100 m × 0.25 mm × 0.20 µm	1支	7125-A002
1.5 mL样品瓶	短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm	100/pk	1109-0519
1.5mL样品瓶盖	9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色PTFE隔垫 45°Shore A; 1.0 mm	100/pk	0915-1819
微孔滤膜	尼龙，50 mm，0.45 µm	100片	AM025045