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Cat. Number
WLRE8208KIT
Chemical Name
WLRE8208KIT RNA 恒温快速扩增试剂盒(荧光型)-II
Qty 1
48T
References

【产品名称】

通用名称:RNA 恒温快速扩增试剂盒(荧光型)-II

【包装规格】

货号:WLRE8208KIT

规格:48 份/盒

【原理概述】

本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩增技术:在常温恒温下,特殊修饰的反转录酶利用特异性引物 DNA 和模板 RNA 合成cDNA 链,反应体系中的重组酶、单链 DNA结合蛋白和 DNA 聚合酶以新合成的 cDNA链为模板进行快速核酸扩增反应。本试剂盒在 42 ºC 下,依赖核酸外切酶的作用,加入根据模板设计的特异的分子探针,使用荧光监测设备能实现对目标片段扩增过程的实时监控。适用于实验室级别的 RNA 扩增以及其他检测用途的 RNA 扩增使用。

【产品特点】

本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、反应时间短(仅需 20 min)等优点,反应组分为干粉状态,操作简便,易于保存。

可适用于各种品牌的荧光定量 PCR 仪,恒温荧光扩增仪器等荧光检测设备。

【引物设计】

建议使用长度在 30-35 bp 的引物,引物过短会影响扩增速度和检测灵敏度;引物设计避免形成二级结构而影响扩增;扩增子长度建议在 150-500 bp。

【荧光探针设计】

探针序列不与特异性引物识别位点重叠,长度为 46-52 nt,序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基。探针共有四个修饰位点:距离 5’端的≈35 nt 的中部位置标记一个 dSpacer(四氢呋喃,THF),作为核酸外切酶的识别位点;THF 位点的上游标记一个荧光基团,下游标记一个粹灭基团,两个基团的间距为2-4 nt;THF 距离3’末端≥15 nt,并且 3’末端标记一个修饰基团,例如胺基、磷酸基团或 C3-Spacer。

原理1.jpg

原理2.jpg

【试剂盒组成】

组成

含量

A buffer

1.6 mL×1管

B buffer

150 μL×1管

试剂

48份

使用说明书

1份

注:考虑到核酸降解问题,RNA 系列产品不提供正对照模板和引物探针。

【试剂盒储存】

1.运输温度:≤20ºC的恒温环境;

2.储存条件:储存温度≤-20°C(±5°C)恒温环境,避光保存,避免重压、反复冻融;

3.产品有效期:14个月;

4.生产日期见外包装。

【注意事项】

1. 由于试剂盒灵敏度非常高,在进行反应时请注意避免核酸污染,并设置空白对照;

2.使用时请取出实验所需的 MIRA 反应单元的数量,剩余部分请置于存储条件下。

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