上海惠诚生物脂质体的CHO瞬转表达培养基_上海惠诚生物生物试剂,标准品,仪器设备,耗材,一站式服务

服务热线：13917250134「同微信」

您的位置：首页>>生命科学>>细胞培养>>上海惠诚生物脂质体的CHO瞬转表达培养基

产品中心

/ Products Classification 点击展开+

Cat. Number

Trans Z CHO

Chemical Name

上海惠诚生物脂质体的CHO瞬转表达培养基

Qty 1

References

基于脂质体的CHO瞬转表达培养基

上海惠诚生物提供的CHO 瞬转表达基础培养基（Basal Medium）与补料培养基（Feed Medium）是完全化学成分限定（Chemically Defined），均不含血清、水解物及任何动物来源的成分，适合于不同亚型中国仓鼠卵巢细胞（CHO-K1 和 CHO-S 细胞）的高密度悬浮培养，可实现重组蛋白和抗体的高水平表达：培养 7 天表达量在 500mg/L 左右，14 天表达量 1000mg/L 左右，部分可达 2g/L 以上。

上海惠诚生物提供的 CHO 细胞瞬转表达培养基已完成美国 DMF 登记（DMF039790），更有力的支持客户需求。

产品描述

名称	备注	谷氨酰胺	葡萄糖	生长因子	适用细胞
TransCHO	初始培养基	含	6 g/L	不含	CHO K1, CHOS 等
CHO FM02AB	补料培养基	不含	80 g/	不含
CHO enhancer	表达增强剂	不含
Trans Z 和 Trans 8	转染试剂	NA

推荐使用说明

步骤	使用方法
细胞传代	0.3 e6 cells/mL 接种，3 天传代一次，当细胞倍增时间不低于对照培养基时认为细胞完全适应新培养基，进入下一步骤；
转染前一天	密度调整到 2e6 cells/mL
转染当天	以 20mL 培养体积为例（其他培养体积，相关试剂需要按体积折算） 1：用新鲜培养基稀释细胞密度至 5e6 cells/mL; 2: 将 44ug 质粒（即 2.2ug/mL）与 40uL Trans Z （即 2.0uL/mL）混合，可不孵育；然后将此混合物滴加到培养基中，并摇匀； 3: 缓慢加滴加 140 uLTrans 8 （即 7.0uL/mL）至培养基中，边滴加边混合，使混合物能均匀扩展； 4: 摇瓶放入摇床中，培养时间记为 Day0, 转染结束；
补料培养	1：转染后~24h 左右补加 0.3%的 CHO enhancer （仅此一次）和 8%的 CHO FM02AB，并降温至 32℃培养； 2：之后每 4 天补加一次 8%的 CHO FM02AB，葡萄糖按需添加（通常 Day6 和 Day9 分别添加 4g/L 即可）； 3：活力≤60%即可培养结束
温度及其他参数	1：初始 37℃，转染~24h 时降温至 32℃； 2：摇床转速 120rpm, 50mm 振幅，5-8% CO2；

产品运输及存储

运输：常温或冷链运输；

存储：2~8℃，干燥、避光保存；

有效期：基础培养基干粉：2 年；

基础培养基液体：1 年；

补料培养基干粉：2 年；

补料培养基液体：1 年（开封后建议在 3 个月内使用完）。

应用范围

宥艺生物培养基可用于 CHO 细胞冻存、复苏、传代、高密度强化工艺培养及灌流培养，可实现

细胞快速生长，维持细胞高活率及蛋白该表达。

使用指南

细胞冻存

1．准备处于对数生长期状态较好的细胞，且细胞活率在 90%以上；

2．检测活细胞密度，计算所需的冻存培养基体积，计算最终细胞密度 1~1.5×10 7 cells/mL；

3．准备好所需的冻存培养基：90%基础培养基+10% DMSO，2~8℃冷藏保存；

4．设置离心力 200×g，离心 5 min，用冻存培养基重新悬浮细胞至冻存体积；

5．将悬浮细胞等分保存至适宜规格的细胞冻存管中；

6．将细胞冻存管置于程序降温盒中，按照降温标准进行降温；

7．将细胞转移到液氮罐中保存。

细胞复苏

1．提前打开水浴锅，并设置温度至 36.5℃~37.0℃；

2．将细胞从液氮罐中移出后，快速在水浴锅中融化冷冻的细胞（＜3 min）；

3．将冷冻管中的细胞液全部转移到 125 mL 含有 30 mL 预温过的基础培养基的摇瓶中；

4．置于 36.5~37.0℃，5~8% CO 2 ，转速 120 rpm（轨道振幅 50 mm）的摇床中培养；

5．细胞至少传代 2 次，待细胞完全复苏且活率在 90%以上，可按计划进行后续操作。

细胞传代

1．将基础培养基放入 36.5~37.0℃条件下预热 20 min；

2．检测活细胞密度，按接种密度为 0.3×10 6 cells/mL 的最终传代体积，计算所需种子液量；

3．无菌转移所需量的种子液，添加至含所需体积的已预热的基础培养基的摇瓶中；

4．将摇瓶放入温度 36.5~37.0℃，120 rpm（振幅 50 mm）（摇瓶底面积增大，需减小摇床转速），

5%~8% CO 2 的细胞培养摇床中进行培养；

5．每 3 天用新鲜的培养基按上述步骤进行传代培养。