上海惠诚生物HEK293 瞬转表达培养基_上海惠诚生物生物试剂,标准品,仪器设备,耗材,一站式服务

上海惠诚生物提供的HEK293 瞬转表达基础培养基（Basal Medium）与补料培养基（Feed Medium）是完全化学成分限定（Chemically Defined），均不含血清、水解物及任何动物来源的成分，适合于不同亚型 HEK293 细胞的高密度悬浮培养，可实现重组蛋白和抗体的高水平表达：培养 5 天表达量在200mg/L 左右，7 天表达量 500mg/L 左右，部分可达 1g/L 以上。

上海惠诚生物提供的HEK293 瞬转表达培养基已完成美国 DMF 登记（DMF039790），更有力的支持客户需求。

HEK293 细胞培养基产品描述

名称	备注	谷氨酰胺	葡萄糖	生长因子	适用细胞
HEK293 CD05	初始培养基	含	6 g/L	不含	Expi293F 等
HEK293 FM01AB	补料培养基	不含	60g/L	不含
HEK293 enhancer	分泌性蛋白表达增强剂	不含
PEI	转染试剂	0.5mg/mL

推荐使用说明

步骤	使用方法
关键参数汇总	转染时细胞密度：3~5e6 cells/mL, DNA: 1.3mg/L, PEI:4mg/L
细胞传代	0.3 e6 cells/mL 接种，3 天传代一次，当细胞倍增时间不低于对照培养基时认为细胞完全适应新培养基，进入下一步骤
转染前一天	细胞密度调整到~2 e6 cells/mL 左右
质粒与 PEI 预处理	以 20mL 培养体积为例（其他培养体积，相关试剂需要按体积折算） 1：取 160uL Trans PEI (母液是 0.5mg/mL),加入 1mL HEK293 CD05 培养基混合均匀； 2：像 1）中混合液体中加入 26ug 的质粒（即质粒用量 1.3mg/L)，混合均匀； 3: 静止 15~20min
转染	1：用新鲜培养基调整细胞密度至 3~5 e6cells/mL (很重要）； 2：缓慢滴加上述 PEI 与 DNA 的混合物，并摇动摇瓶使混合物均匀分散； 3：转染当日记为 Day0，放入 37℃摇床中，完成转染；
补料培养	1：转染后~24h 内补加 0.5%的 HEK293 enhancer （仅此一次，且只分泌性蛋白或抗体需要添加，膜蛋白无需加 HEK293 enhancer）和 7%的 HEK293 FM01AB； 2：Day4 再补加一次 7%的 HEK293 FM01AB 和 3g/L 的葡萄糖（如培养时间≤5 天，此步忽略）； 3：活力≤70%即可培养结束或其他指定培养基时间
温度及其他参数	1：温度 37℃，不降温 2：摇床转速 120rpm, 50mm 振幅，5-8% CO2；