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Cat. Number
HA11501-ZL
Chemical Name
HA11501-ZL pET28TEV-Un1Cas14a1 质粒 (1 μg 干粉)
Qty 1
1ug
References

pET28TEV-Un1Cas14a1 质粒是 Un1Cas12f1(又名 Un1Cas14a1)蛋白的表达质粒,用于在大肠杆菌 BL21(DE3)菌株中表达制备 Un1Cas12f1 蛋白。该质粒含有乳糖操纵子诱导表达系统,可以用 IPTG 或乳糖及其类似物诱导表达目的蛋白。


Un1Cas14a1 是一种内切核酸酶,其在 tracrRNA:crRNA(或 sgRNA)的引导下,特异结合并切割靶标 ssDNA,且不受 PAM 位点的限制。相比于其他的 Cas 蛋白,Cas12f1 蛋白的分子量普遍较小(400-700AA),其中 Un1Cas12f1 的分子量约 61.5 kd。与其他 Cas12 蛋白类似, Un1Cas12f1 蛋白同样拥有针对 ssDNA 的反式切割活性,可用于靶标核酸的分子检测(详细信息,请参考 PMID: 30337455)。


订购信息:

产品名称规格
推荐浓度
pET28TEV-Un1Cas14a1 质粒1 μg 干粉20 μL, 50 ng/μL


产品组成:

pET28TEV-Un1Cas14a1 质粒 (1 μg 干粉)。 


保存条件: 

4℃储存;≤ 4℃运输。


产品特点:

名称描述
质粒类型             大肠杆菌表达 Un1Cas14a1 蛋白
质粒大小6972 bp
蛋白大小(切除标签后) 61.5 KDa
等电点 (PI) (切除标签后)9.77
蛋白标签 6 × His Tag
标签切除蛋白酶位点 TEV 蛋白酶
启动子 T7 Promoter
复制子 pBR322 
终止子T7 terminator
表达宿主 大肠杆菌 BL21(DE3)或其它含有 T7 RNA 聚合酶的
培养条件  LB 培养基,37℃
抗性  Kan
诱导剂IPTG 或乳糖及其类似物
5' 测序引物T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
3' 测序引物 T7-ter: 5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'


产品图谱:

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注意事项 

1. 转化后使用 Kan 抗性平板筛选。 

2. 除 E. coli BL21(DE3)外,该质粒还可以转入其它含有 DE3 片段或表达 T7 RNA 聚合酶的菌株,用于表 达该目的蛋白。由于该质粒带有 Kan 抗性基因,需要使用 Kan 抗性平板筛选,故宿主菌株本身不能带 有 Kan 抗性。 

3. 本产品仅供科研使用。


蛋白表达过程中相关试剂:

HA21014 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG

无水乳糖

E-005 重组TEV蛋白酶


LB培养基(1L)配置方法:

胰蛋白胨 Tryptone                                     10g

酵母浸粉 Yeast extract powder                   5g

氯化钠                                                        10g

搅拌溶解后,121℃高压灭菌半小时,无菌环境下冷却至室温,加入菌液,37℃摇床过夜培养即可


相关Crispr/cas酶:

重组CRISPR-Cas9蛋白 

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FnCas12a(cpf1)

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AacCas12b(C2c1)

CRISPR LbCas12a(cpf1)

CRISPR BbCas12a(cpf1)

CRISPR HkCas12a(cpf1)蛋白

OsCas12a(cpf1)蛋白

BoCas12a(cpf1)蛋白

TsCas12a(cpf1)蛋白

dCas9蛋白

Cas14a1核酸酶


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