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Cat. Number
HA11632-ZL
Chemical Name
pET28TEV-BoCas12a 质粒 (1 μg 干粉)
Qty 1
1ug
References

pET28TEV-BoCas12a 质粒是 BoCas12a (又名 BoCpf1) 蛋白的表达质粒,用于在大肠杆菌 BL21 (DE3) 菌株中表达制备 BoCas12a 蛋白。该质粒含有乳糖操纵子诱导表达系统, 可以用 IPTG 或乳糖及其类似物诱导表达目的蛋白。


BoCas12a 来源于 Bacteroidetes oral taxon 274 菌株。BoCas12a 是由 crRNA 介导的 DNA 核酸内切酶,在靶标双链 DNA 存在 PAM (TTN) 序列的情况下,特异地切割靶标双链 DNA, 使 DNA 双链断裂并生成粘性末端。同时,当 BoCas12a 蛋白与 crRNA、靶标双链 DNA 结合形成三元复合 物后,便会被激活针对 ssDNA 的反式切割活性,将体系中的 ssDNA 切碎。因此,BoCas12a 蛋白既可用于 靶标 dsDNA 的体外切割,也可用于开发核酸快速检测试剂盒等。


订购信息:

产品名称规格
推荐浓度
pET28TEV-BoCas12a 质粒1 μg 干粉20 μL, 50 ng/μL


产品组成:

pET28TEV-BoCas12a 质粒 (1 μg 干粉)。 


保存条件: 

4℃储存;≤ 4℃运输。


产品特点:

名称描述
质粒类型             大肠杆菌表达 BoCas12a 蛋白质
质粒大小9145 bp
蛋白大小(切除标签后) 148.2 KDa
等电点 (PI) (切除标签后)8.16
蛋白标签 6 × His Tag
标签切除蛋白酶位点 TEV 蛋白酶
启动子 T7 Promoter
复制子 pBR322 
终止子T7 terminator
表达宿主 大肠杆菌 BL21(DE3)或其它含有 T7 RNA 聚合酶的
培养条件  LB 培养基,37℃
抗性  Kan
诱导剂IPTG 或乳糖及其类似物
5' 测序引物T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
3' 测序引物 T7-ter: 5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'


产品图谱:

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注意事项 

1. 转化后使用 Kan 抗性平板筛选。 

2. 除 E. coli BL21(DE3)外,该质粒还可以转入其它含有 DE3 片段或表达 T7 RNA 聚合酶的菌株,用于表 达该目的蛋白。由于该质粒带有 Kan 抗性基因,需要使用 Kan 抗性平板筛选,故宿主菌株本身不能带 有 Kan 抗性。 

3. 本产品仅供科研使用。


蛋白表达过程中相关试剂:

HA21014 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG

无水乳糖

E-005 重组TEV蛋白酶


LB培养基(1L)配置方法:

胰蛋白胨 Tryptone                                     10g

酵母浸粉 Yeast extract powder                   5g

氯化钠                                                        10g

搅拌溶解后,121℃高压灭菌半小时,无菌环境下冷却至室温,加入菌液,37℃摇床过夜培养即可


相关Crispr/cas酶:

重组CRISPR-Cas9蛋白 

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LbuCas13a 核酸酶

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AacCas12b 核酸酶

AsCas12a(cpf1)

FnCas12a(cpf1)

AapCas12b

AacCas12b(C2c1)

CRISPR LbCas12a(cpf1)

CRISPR BbCas12a(cpf1)

CRISPR HkCas12a(cpf1)蛋白

OsCas12a(cpf1)蛋白

BoCas12a(cpf1)蛋白

TsCas12a(cpf1)蛋白

dCas9蛋白

Cas14a1核酸酶


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