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/ Products Classification 点击展开+Cat. Number | EH02501 |
Chemical Name | EH02501 M-MuLV反转录酶 M-MuLV Reverse Transcriptase |
Qty 1 |
2000U |
Qty 2 | 10000U |
References | M-MuLV反转录酶(M-MuLV Reverse Transcriptase)是一种RNA依赖性DNA聚合酶,可实现RNA模板的逆转录。M-MuLV反转录酶来源于小鼠白血病病毒(Murine leukemia virus,MuLV)。M-MuLV反转录酶是一个多聚体蛋白,包含560个氨基酸,是MuLV基因组的一部分。它具有DNA聚合酶活性和RNase H活性,可分离得到不具RNase H活性的反转录酶变体M-MLV RT。 M-MuLV反转录酶可使用RNA作为模板,合成第一链cDNA。M-MuLV反转录酶是一种高效和高保真的RNA逆转录酶。它广泛用于原核生物mRNA的逆转录和病毒RNA的检测,在cDNA合成与各种RNA检测技术中发挥关键作用。M-MuLV反转录酶是实现RNA等温扩增的关键酶,它可以直接识别RNA模板,高效转录为cDNA,为后续DNA扩增提供模板。使用M-MuLV反转录酶,RPA技术可以实现RNA病毒的快速、高效和高保真扩增,在分子诊断中具有重要应用价值。 M-MuLV反转录酶由E.coli表达的重组蛋白,是将蛋白基因接入稳定表达载体,经克隆筛选,质量验证,挑选的稳定表达株,由化学成分确定的培养基(不含有任何动物源成分)发酵制备,工艺稳定,保证了产品质量及批次间的一致性。 规格参数: 货号:EH02501 规格:2000U/10000U 为工业客户提供n*10000U。 质量控制: 纯 度: 经高效液相色谱(SEC-HPLC)和SDS-PAGE检测,纯度大于95%.
使用说明: 长期储存于-80℃,首次使用后保存于-20℃,避免反复冻融。 产品特点: 1. M-MuLV反转录酶(M-MuLV Reverse Transcriptase)同时具有DNA聚合酶活性和RNA酶H活性: DNA聚合酶活性:可以使用RNA模板合成DNA,实现RNA的逆转录; RNA酶H活性:可以切割RNA-DNA杂合体中的RNA链,释放RNA模板并使第一链cDNA成熟。 2. 高效: M-MuLV反转录酶具有较高的逆转录效率,可在短时间内合成较高产量的cDNA。在优化条件下,其cDNA产量可达2-3μg/μL反转录体系。 3. 高忠诚度: M-MuLV反转录酶可高保真的合成cDNA,其错配率低于10^-5,这有利于后续的基因克隆与检测。 4. 添加剂耐受性: M-MuLV反转录酶对常用的反转录添加剂如DTT、rNTP、cDNA合成引物等都有较好的耐受性,易于优化反转录体系。 M-MuLV反转录酶(M-MuLV Reverse Transcriptase)主要应用: 1. cDNA文库构建 M-MuLV反转录酶可实现mRNA的高效逆转录,合成第一链cDNA。这是cDNA文库构建的第一步,对基因克隆与功能研究至关重要。 2. RT-PCR 将M-MuLV反转录酶用于RNA的逆转录,得到的cDNA可作为PCR的模板,实现RNA的检测与扩增。这种联合使用大大扩展了PCR的应用范围。 3. Northern blot 将M-MuLV反转录酶合成的放射性或非放射性标记的cDNA用于Northern blot,可以实现特定RNA的检测。 4. cDNA探针 使用M-MuLV反转录酶合成的cDNA可作为各种核酸杂交技术的探针,实现靶核酸的检测。 5. virus检测 设计特异引物,使用M-MuLV反转录酶可首先将病毒RNA逆转录为cDNA,然后采用PCR等技术实现病毒的检测,应用于临床诊断。 6. miRNA检测 miRNA的逆转录依赖M-MuLV反转录酶,得到的cDNA可作为PCR和基因芯片的模板,实现miRNA表达谱的分析。 7. RNA编辑 M-MuLV反转录酶可用于RNA的逆转录,得到的cDNA可进行突变引入等操作,实现RNA功能区的编辑。 8. RNA位点定向诱变 在cDNA合成引物上引入 intended 突变位点,使用M-MuLV反转录酶转录后获得突变体cDNA和相应的RNA。 9. 杂交簇技术 使用M-MuLV反转录酶合成的cDNA探针与靶核酸杂交,实现靶核酸的富集、分离、检测等,这是一种重要的核酸分离技术。 M-MuLV反转录酶(M-MuLV Reverse Transcriptase)在RPA技术中应用: 1. RNA模板扩增 M-MuLV反转录酶可以直接识别RNA模板,合成对应的DNA链,实现RNA的等温扩增。这使RPA技术可以直接用于检测RNA病毒如新型冠状病毒、H1N1等,扩大了RPA的应用范围。 2. 两步反应: RPA可以采用两步反应进行RNA扩增,即: 第一步:使用M-MuLV反转录酶将RNA模板反转录为cDNA; 第二步:使用常规DNA聚合酶对cDNA进行等温扩增。 这种两步法可以避免RNA在RPA反应中的降解,取得更高质量的扩增产物。 3. 高效转录 M-MuLV反转录酶具有较高的转录效率,可以快速转换RNA为cDNA,为后续的DNA扩增提供充足的模板,实现高效的RNA扩增。 4. 热稳定性好 M-MuLV反转录酶具有较好的热稳定性,可以适应RPA反应的温度要求(25-45°C),发挥较高活性,实现RNA的等温扩增。 5. 高保真 M-MuLV反转录酶具有较高的复制保真度,可以准确转录RNA序列为cDNA,为高保真的RNA扩增奠定基础。 相关RPA原料: EH03201 Bst DNA聚合酶 Bst DNA polymerase EH04801 核酸外切酶 IV Exonuclease IV EH04701 核酸外切酶 III Exonuclease III EH02501 M-MuLV反转录酶 M-MuLV Reverse Transcriptase EH03301 Bsu DNA聚合酶大片段 Bsu DNA polymerase, Large Fragment EH04501 重组肌酸激酶(CK) Creatine Kinase EH03501 T4 UvsX重组酶 T4 UvsX Recombinase EH03401 T4噬菌体基因32编码蛋白(gp 32) T4 gene 32 Protein EH03601 T4 UvsY蛋白 T4 UvsY Protein HM0058 重组鼠源RNase抑制剂(40 U/µL) RNase Inhibitor 相关Crispr/cas酶: 相关探针产品推荐: HC80202-01 Crispr Cas12a检测系统用荧光双标记探针(DNA荧光-淬灭双标记) 1OD/950元 HC80202-02 Crispr Cas13a检测系统用荧光双标记探针(RNA荧光-淬灭双标记) 1OD/950元 HC80202-03 Crispr Cas13a检测系统用双标记探针(RNA Biotin和FAM双标记) 1OD/1350元 HC80202-04 Crispr Cas12a检测系统用双标记探针(DNA Biotin和FAM双标记)1OD/1150元 HC80202-05 Cas14a检测系统用荧光双标记探针(DNA荧光-淬灭双标记)1OD/950元 HC80202-06 Cas14a检测系统用双标记探针(DNA Biotin和FAM双标记)1OD/1150元 RAA/RPA试剂盒推荐: HP90206-48 RT-RAA核酸扩增试剂盒(试剂条法) 上海惠诚生物科技有限公司自2010年成立以来,一直致力于为客户提供试剂,仪器设备和耗材一站式服务。目前在苏州和南通的研发生产基地,专注于体外诊断蛋白,靶标蛋白,工业用酶和细胞因子的生产和定制,按照GMP标准,为工业客户提供大包装蛋白原料。 更多产品请联系惠诚生物! 蛋白原料网站:www.acediag.com 全国统一服务热线:021- 60496554 24小时手机服务: 13917250134(同微信)QQ:1715451510 Email:info@e-biochem.com |