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Cat. Number
EH00402
Chemical Name
EH00402 AapCas12b 核酸酶
Qty 1
100pmol
Qty 2
1000pmol
References

AapCas12b 来源于嗜酸耐热菌 Alicyclobacillus acidiphilus,最佳剪切反应温度为 60℃,比 AacCas12b更耐高温。它属于II型CRISPR-Cas系统,可利用crRNA来识别和切割DNA。AapCas12b相对分子质量约为180kDa。它包含一个核酸酶结构域,可与crRNA和DNA结合进行切割。

本产品由E.coli表达的重组蛋白,是将蛋白基因接入稳定表达载体,经克隆筛选,质量验证,挑选的稳定表达株,由化学成分确定的培养基(不含有任何动物源成分)发酵制备,工艺稳定,保证了产品质量及批次间的一致性。


规格参数:

货号:EH00402      

规格:100/1000pmol.

为工业客户提供n*1000pmol规格


质量控制:

纯      度: 

经高效液相色谱(SEC-HPLC)和SDS-PAGE检测,纯度大于95%.

 

使用说明:

长期储存于-80℃,首次使用后保存于-20℃,避免反复冻融。


技术原理:

AapCas12b识别23bp的crRNA,crRNA的其中20bp与DNA靶区匹配。AapCas12b与crRNA和DNA结合后,激活其内切酶活性,在靶DNA下游位点挑选TTTV型的PAM序列,从而切割靶DNA。


特点与优势:

(1)AapCas12b产生5'悬挂端和3'突出的四核苷酸,这可有利于后续的基因修饰。

(2)AapCas12b具有较高的靶向灵活性,可识别TTTV的PAM,对应更多潜在的靶点。

(3)AapCas12b在植物细胞中的效率较高,可实现更高效的基因编辑。

(4)AapCas12b产生的切割产物末端较平滑,可用于获得更高的基因编辑效率。


AapCas12b应用:

AapCas12b可用于CRISPR基因编辑,实现基因敲除、替换、激活及抑制等。

(1)作物基因组编辑:实现作物性状的改良与优化。

(2)生物医学研究:用于研究基因功能、细胞信号转导等机制。

(3)病毒载体构建:用于构建基因治疗载体,传送至靶细胞实现体内基因编辑。

(4)抗菌靶向:可用于研发针对某些条件致病菌的靶向治疗方法。


AapCas12b在体外诊断IVD领域有重要的应用潜力:

1. 基因检测

AapCas12b可通过crRNA检测靶DNA的存在,用于实现基因突变、病原体DNA等的检测。

工作流程如下:

(1) 设计与靶DNA或突变位点互补的crRNA。

(2) 将crRNA与检测样本中的DNA共同温育。

(3) 如果存在互补的靶DNA,AapCas12b与之结合并激活,切割靶DNA。

(4) 通过聚合酶链式反应(PCR)扩增切割产物,或通过荧光定量PCR检测AapCas12b的活性,判断靶DNA是否存在。

(5) 相比PCR方法,这种基于Cas12的检测更加特异和灵敏,实现快速高通量的体外诊断。

2. 病原体检测

选择与病原体如病毒、细菌DNA高度保守的区域设计crRNA,可特异性检测该病原体,用于临床快速诊断及流行病监测。

3. 肿瘤相关突变检测

针对常见的肿瘤相关基因突变设计crRNA,可实现肿瘤标记物和治疗靶点的检测,用于肿瘤的早期诊断和针对性治疗。

4. 胎儿遗传病检测

检测胎儿DNA中相关遗传病突变位点,用于产前诊断。优点是检测快速,通量高和成本低。

5. 转基因生物检测

可检测常见转基因生物中引入的外源DNA,用于食品安全性监测和环境检测。

AapCas12b作为一种新型的CRISPR效应蛋白,其基于RNA指导的DNA靶向切割功能,使其在体外快速检测和诊断方面具有重要的应用优势。


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