Cisbio HTRF 炎症因子检测试剂盒，炎症研究检测试剂_上海惠诚生物生物试剂,标准品,仪器设备,耗材,一站式服务

HTRF PGE2，LTB4 和 LTC4 检测都是基于 HTRF 技术的竞性免疫反应。以 PEG2 为例，使用d2标记的 PGE2 和销穴状化合物 (Eu Cryptate)标记的 PGE2 抗体，样品中的游离 PEG2与 d2标记 PEG2 竞争销标记的 PEG2 抗体的抗原结合位点(图 7)。当标记的 PEG2抗体与d2 标记的 PEG2 结合后，会发生能量共振转移，从而产生荧光信号。样品中的游离 PEG2 越多游离的 PEG2与抗体结合越多，荧光信号越小。

订购信息

产品名称	产品规格	产品货号	产品规格	产品货号
LTB4 Kit	500 tests	64LB4PEG	1000 tests	64LB4PEH
LTC4 Kit	500 tests	64LC4PEG	1000 tests	64LC4PEH
Prostaglandin E2 Kit	500 tests	62P2APEG	1000 tests	62P2APEH
Histamine Dynamic Kit	96 tests	62HTMDPET	500 tests	62P2APEG

产品特点

可进行细胞、细胞上清液检测和生化检测。
操作过程简单、快速
检测范围高
Z值高
可以微型化到 10 uL 体系，适用于自动化操作和高通量筛选(HTS)
不会与 PGH2 和 PGF2 产生交叉反应

产品应用

PGE2 用于检测化合物对 COX-2 和前列腺素合成酶的调节
LTB4 和 LTC4 可分别用于检测白三烯 A4 水解和白三烯 C4 合成酶的活性
组胺试剂盒可对组胺进行定量检测，进行过敏和哮喘评估

实验过程

PEG2、LTB4 和 LTC4 的检测过程为，在细胞刺激孵育后，只需要进行加入 HTRF 检测试剂孵育一段时间即可读数(图9)

图9.HTRFPGE2检测过程

组胺检测过程与PEG2、LTB4和LTC4测稍有不同，组胺检测需要乙化，乙化和检测可以在同一块板子中同时进行(见图 10)，容易实现自动化操作。检测过程包括两步:

第一步:乙酷化

第二步:加入 HTRF试剂检测组胺

产品性能

应用实例

PGE2 检测

HTRFPGE2检测试剂盒的一个优点是，在细胞存在的情况下不会降低分析性能。将 U937细胞与10nM豆佛波醇乙(phorbol 12-myristate 13-acetate，PMA) 一起培养 48 小时，然后将细胞以1,105个细胞//100 l与 10 g/ml 的脂多糖(LPS)以及不同浓度的美辛一起加入微孔板中。PGE2 检测试剂可以直接加入细胞中，或者转移 50 细胞上清液到新的微孔板中然后加入检测试剂，室温孵育 4 小时后，在 620nm 和 665nm 处分别读取信号。结果如图 11 所示，基于细胞的检测与上清液检测，两者的结果没有显著差异。加入啊噪美辛 (PGE2 产生的抑制剂)，刺激单核细胞产生 PGE2，HTRF 测得到噪美辛 IC50 (1.0 0. nM)，与之前发表的数据一致。

图11.基于细胞与上清液的 HTRF PEG2检测，两者结果一致

组胺检测

大鼠嗜碱粒细胞(RBL-2H3)，分别在含 2.5 uM 钙离子载体 (ionomycin)和无离子载体条件下共培养，37C 刺激细胞 30 分钟后用 HTRF”的释放。在细胞裂解液中测定总的组胺含量，在只用培养基培养细胞中检测细胞自发释放的组胺含量。结果如图 12 所示。

图 12.大鼠嗜碱粒细胞的组胺释放研究

相似的研究在人外周血嗜碱粒细胞中进行(图13)。将离子载体得到的组胺非特异性释放，与用膜结合的 lgE 与抗 gE 抗体交联诱导的特异性脱粒进行比较。误差线表示3 次重复的标准差。

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