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| Cat. Number | 64PD1PEG/64PD1PEH |
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| Chemical Name | Cisbio 人PD1/PD-L1生化结合试验即用试剂盒 Human PD1/PD-L1 biochemical binding assay，免疫检查点抑制剂筛选 |
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| Qty 1 |
500tests |
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| Qty 2 | 1000tests |
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| Storage condition | 将试剂盒存储在≤-60°C。在适当的储存条件下，试剂在到期日之前是稳定的标签上有说明。 |
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| References | PD1是一种调节T细胞反应的免疫检查点受体。它的配体PD-L1，通常在肿瘤细胞表面过表达。当PD1与PD-L1结合时，T细胞反应被抑制，有助于肿瘤免疫抵抗。检查点抑制剂阻断PD1/PD-L1复合物的形成在癌症免疫治疗中引起了相当大的兴趣。 HTRF PD1/PD-L1结合试验旨在测量PD-L1和PD1之间的相互作用。采用均相时间分辨荧光(HTRF)技术，使测定简单、快速化合物和抗体阻滞剂在高通量格式的表征。 技术原理： 如图1所示，使用Europium标记的anti-Tag1检测PD-L1与PD1的相互作用(HTRF供体)和XL665标记的anti-Tag2 (HTRF受体)。当供体抗体和受体抗体由于PD-L1和PD1结合而靠近，供体抗体的激发会触发荧光共振能量转移(FRET)向受体抗体，这反过来在665nm特异性发射。这特异性信号与PD1 / PD-L1相互作用的程度成正比。因此，化合物或抗体阻断PD1/PD-L1相互作用会导致HTRF信号降低。 产品信息：
贮存稳定性 将试剂盒存储在≤-60°C。在适当的储存条件下，试剂在到期日之前是稳定的标签上有说明。 复溶后，标记的PD-L1和PD1原液可以冷冻，并且只能解冻一次。 解冻(或复溶)后，抗标签溶液可以冷冻一次。为了避免冻结/解冻循环，建议将剩余的原液分配到一次性溶液中储存温度≤-60°C的塑料小瓶。 解冻的PPI铕检测缓冲液可以储存在2-8°C的场所。
试验开始前：
准备tag1-pd-l1和tag2-pd1工作方案:
制备抗tag1 eu隐化试剂和抗tag2 xl665抗体工作液: 每个孔需要5µL的抗标记给体和受体试剂。 准备pd1 / pd-l1标准溶液: •每个孔需要2 μ L标准。 •为了消除任何标准粘连，我们建议在每次稀释之间更换尖端。 建议的标准稀释程序如下所示: •解冻PD1 / PD-L1标准原液，这产生高标准(标准7:2.5µM (2 500 000 pM))。 •使用高标准(Std 7)，使用5倍连续稀释制备标准曲线，如下所示: -将40 μ L的PPI铕检测缓冲液从Std 6分到Std 0 -将10 μ L标准品加入40 μ L PPI铕检测缓冲液中，轻轻混合，重复系列稀释 标准方案:std6、std5、std4、std3、std2、std1 这将为分析物创建7个标准。Std 0是单独的PPI铕检测缓冲液 分析方案 在20 μ l最终体积中进行抑制试验的标准方案
结果 下面所示的数据不能代替在实验室中获得的数据，而应仅视为一个例子。 带有闪光灯的HTRF兼容阅读器上的读数。 请注意，不同HTRF®兼容阅读器的结果可能不同。 |
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