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| Cat. Number | H081801/H091801 |
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| Chemical Name | 奥浦迈培养基 H081801/H091801 无血清杂交瘤细胞培养基, 用于生物制药研发及生产 |
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| Qty 1 |
1000ml |
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| Qty 2 | 10L |
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| Storage condition | 2~8℃冷藏，干燥避光保存 |
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| References | HybriSFM-P1B 是无血清、含低浓度蛋白、专门针对高密度杂交瘤细胞生长开发的培养基，适用于不同杂交瘤细胞高密度悬浮培养和蛋白抗体表达。 订购信息： 基础培养基
高性能补料
超浓缩补料
应用范围 HybriSFM-P1B 适用于科研和基于细胞培养的大规模生物制品的生产，但不可直接用于人体或作为药物使用 储存运输方法 储存: 2~8”C冷藏，干燥避光保存 运输: 常温 (液体)、冷藏 (干粉) 有效期 HybriSFM-P1B Medium 液体: 6个月HybriSFM-P1B DPM 干粉: 12 个月 液体培养基配制方法 1. 取最终配制体积 90%的超纯水，水温 25~35C(注:一次性配制体积不低于 1L): 2. 称量 16.61 g/L 千粉培养基，缓慢加入水中并搅拌: 3. 称量 2.45 g/L 碳酸氢钠，加入水中并持续搅拌: 4. 搅拌 20 分钟: 加入5N NaOH 调节 pH直至完全溶解: 加 5N HCI 将pH 调回至7.0; 5. 加超纯水校正到最终配积，用 NaCI 调节渗透压到 32010 mosm/kg; 6. 继续搅拌 10 分钟，无菌过滤到合适容器。 干粉及液体培养基质量指标
培养条件 37°C，5-10%CO2; 摇床设置：转速125-135 rpm。
使用方法 1. 直接转换 如果当前杂交瘤细胞已经是悬浮培养于无血清培养基中，大部分情况下，可以直接适应奥浦迈培养基，只需按照日常传代方式（稀释）更换培养基即可。 2. 去血清驯化 如果细胞目前培养于添加血清的基础培养基中，则需要进行减血清驯化，下面为细胞驯化要点： 1) 选用低代次，对数期细胞开始驯化； 2) 减血清可按照 10%、5%、2.5%、1%、0%的顺序进行，在每个血清含量进行细胞传代，直至细胞生长正常，再进入下一个血清浓度。 3. 细胞传代 当杂交瘤细胞密度达到(2~3)x106 cells/ml 时，将细胞以(0.2~0.3)x10 6 cells/ml 接种于新的培养基中，继续培 养。接种时无需离心，直接稀释即可。 4. 流加批次培养生产抗体 对于基础培养基及其搭配补料，流加批次培养评价时没有固定的最佳补料方案，针对每个细胞和产品都应该利用 DOE 方式进行流加批次培养工艺的建立和优化。 推荐的使用方案如下（流加批次培养最高细胞密度可以达到 10 x106 cells/ml，抗体产量超过 2.5 g/L）： 1) 用于流加培养实验的种子细胞密度约为 3 x 106 cells/ml，按(0.3~0.6)x10 6 cells/ml 密度接种； 2) 建议每天取样检测细胞密度并进行生化分析。接种后第二天或第三天可以开始补料，之后按上表中提供的策 略，进行每天或隔天补料； 3) 当糖溶度低于3g/L 的时候需要额外补加葡萄糖浓缩液至 6g/L 终浓度。 流加批次补料方案参考
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