服务热线
021-60498804
| Cat. Number | P150509 |
||||||||||||
| Chemical Name | 奥浦迈培养基 P150509 干粉DMEM 贴壁细胞培养基，用于生物制药研发及生产 |
||||||||||||
| Qty 1 |
10L |
||||||||||||
| Storage condition | 2~8℃冷藏，干燥避光保存 |
||||||||||||
| References | DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium，杜氏改良Eagle培养基)是一种成分明确的高糖型基础培养基，含有 4.5/L 葡萄糖和L-谷氨胺，不含丙酮酸钠，可用于支持生长快、粘附性低的贴壁细胞生长。DMEM不含蛋白质、脂类或任何生长因子，因此需搭配血清使用。 订购信息：
应用范围： DMEM适用于科研和基于细胞培养的大规模生物制品的生产，但不可直接用于人体或作为药物使用。 储存运输方法： 储存: 2~8℃冷藏，干燥避光保存 运输: 常温 (液体)、冷藏 (干粉) 有效期： DMEM基础培养基(1X) 液体: 12个月 DMEMDPM 干粉: 24个月 液体培养基配制方法： 1. 取最终配制体积90%的超纯水，水温25-35℃ (注:一次性配制体积不低于1L) 2. 称量 13.375g/L 干粉培养基，缓慢加入水中并搅拌; 3. 称量 3.7g/L 酸氢，加入水中并持续搅择 4. 搅拌20 分钟，加 5N HCI将 pH 调回至7.0; 5. 加超纯水校正到最终配液体积; 6. 继续搅拌 10 分钟，无菌过滤到合适容器。 干粉及液体培养基质量指标：
培养条件: 温度37°C，湿度95%，5% CO2 细胞复苏: 1. 将DMEM培养基置于37℃，5% CO2的环境中进行预热30min; 2. 取出细胞冻存管，迅速转移至37C水浴中融化; 3. 将融化的细胞悬液转移至含有 5-10ml 新鲜培养基的无南离心管中 4. 800rpm 低速离心5min 后小心去掉上清; 5. 用适量新鲜培养基重悬细胞,并转移至合适的培养容器中,添加适量血清,轻轻摇晃容器使细胞混匀后于37C5%6 COa环境中进行培养; 6. 在显微镜下观察当贴壁单层并且汇合度在80%左右，进行传代。 细胞培养: 1. 取显微镜下观察生长良好、贴壁单层并且汇合度在 80%左右的贴壁细胞，根据需要选择合适体积培养容器; 2. 预热DMEM培养基:将培养基置于37℃，5% CO2的环境中进行预热30min; 3. 从培养容器中吸出旧培养基并丢弃; 4. 用不含钙、镁的平衡盐溶液冲洗细胞3次 5. 向培养容器中加入0.25% 胰蛋白酶-EDTA，室温育2min(实际育时间因细胞株而异); 6. 显微镜下观察解离情况，当解离程度超过 90%时，倾斜培养容器使细胞上液尽快流出，随后加入适量预热的培养基吹打细胞层表面，使其分散; 7. 800rpm低速离心5min后小心去掉上清，使用适量预热的培养基重悬细胞并分装至新的培养容器中，随后加入适量新鲜培养基与血清; 8. 轻轻摇晃容器使细胞混匀后转移至37℃，5% CO2环境中进行培养。 细胞冻存： 1. 选择处于对数生长期的细胞进行冻存，活率>90%; 2. 向程序降温盒中加入适量异丙醇后置于4C环境预冷; 3. 配制细胞冻存液：冻存液=DMEM+10%FBS+10%6DMSO，冻存液配好后置于4C环境预冷 4. 冻存密度：0.5~1.5)x107cells/ml; 5. 取生长良好的贴壁细胞，0.25% 胰蛋白酶-EDTA消化后使用新鲜培养基重悬，将细胞液进行800rpm、5min离心，弃去上清; 6. 用适量细胞冻存液重悬细胞，取样计数，调整细胞密度至目标值; 7. 快速分装细胞至冻存管，每管 1~2ml; 8. 将冻存管放入程序降温盒中，-80℃冰箱放置过夜后转移到液氮罐进行保存 上海惠诚生物科技有限公司自2010年成立以来，一直致力于为客户提供试剂，仪器设备和耗材一站式服务，按照客户的研发、生产和质量控制环节整合各种资源，优化资源组合，为客户提供整体解决方案。 产品线包括：生命科学，分析化学，生化试剂和仪器耗材。 相关推荐： 奥浦迈培养基 OPM-293 ProFeed HEK293 细胞无蛋白质补料 更多奥浦迈培养基请咨询！ 全国统一服务热线：021- 60496554 24小时手机服务: 13917250134（同微信）QQ：1715451510 Email：info@e-biochem.com |
||||||||||||
Copyright © 2022 上海惠诚生物科技有限公司
沪ICP备2021037845号-6
