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/ Products Classification 点击展开+Cat. Number | HC80201-06 |
Chemical Name | HC80201-06 Cas12b sgRNA设计合成与纯化 |
Qty 1 |
1套 |
References | CRISPR-Cas12系统在向导RNA的引导下识别含PAM的dsDNA,然后促使靶标dsDNA解链,解链后的靶标dsDNA中的靶标链(TS)与向导RNA形成Rloop,近而释放出Cas12中的RuvC的活性位点;而刚刚解链后的靶标dsDNA中的非靶标链(NTS)此时就会被释放出的活性位点的RuvC切割;这一切割的结果造成靶标DNA的解旋,释放出的靶标dsDNA的TS被RuvC切割;当Cas12完成对靶标dsDNA中的TS和NTS的切割后(顺式切割),会释放出dsDNA,而此时空间被留出来的RuvC的活性位点,一旦有ssDNA进入,都会被切割(反式切割)。 Cas12b核酸酶(又名C2c1)是依赖于RNA介导的内切核酸酶,在靶标DNA存在PAM的情况下,可特异地切割靶标双链DNA。最近,来自张锋团队的研究表明,来源于嗜酸耐热菌且切割活性较高的Alicyclobacillus acidophilus Cas12b更适用于与LAMP结合的“一管法”体系。值得一提的是,AapCas12b与AacCas12b识别相同的sgRNA,因此,非常便于用AapCas12b替换之前的AacCas12b。 CRISPR Cas12a蛋白和CRISPRCas12b蛋白是CRISPR Cas蛋白 Class2 V型中的亚型,V-A cas12a, 又叫cpf1; V-B cas12b, 又称 c2c1。Cas12b和Cas12a的主要区别是: 1. 核酸酶结构域不同,Cas12b蛋白的结构域是RuvC;Cas12a蛋白的结构域是RuvC和Nuc。 2. 向导RNA不同。Cas12b需要crRNA和tracrRNA;Cas12a只需要crRNA,不用tracrRNA。 3. 酶切方式不同。Cas12b酶切7个交错核苷酸;Cas12a酶切的是交错末端,5' overhangs。 4. 应用技术不同。Cas12b蛋白应用的技术是HOLMES v2;Cas12a蛋白应用的技术是DETECTR和HOLMES。 基于Cas12开发的分子诊断技术主要有DETECTR和HOLMES,其中HOLMES将Cas12a更换为Cas12b后,进一步升级为HOLMES v2。该三种方法原理类似,主要区别是对靶标扩增方法的选择不一样。首先,靶标核酸经等温(RPA或LAMP)或变温(PCR)方法扩增富集;然后,扩增产物与Cas12-crRNA结合,激活Cas12的附属切割功能,对ssDNA荧光探针进行切割,释放荧光基团,形成检测信号。使用CRISPR/Cas12b编辑基因成败的关键就在于sgRNA。 上海惠诚生物提供Cas12b sgRNA设计合成与纯化。 相关探针产品推荐: HC80202-01 Crispr Cas12a检测系统用荧光双标记探针(DNA荧光-淬灭双标记) 1OD/950元 HC80202-02 Crispr Cas13a检测系统用荧光双标记探针(RNA荧光-淬灭双标记) 1OD/950元 HC80202-03 Crispr Cas13a检测系统用双标记探针(RNA Biotin和FAM双标记) 1OD/1350元 HC80202-04 Crispr Cas12a检测系统用双标记探针(DNA Biotin和FAM双标记)1OD/1150元 HC80202-05 Cas14a检测系统用荧光双标记探针(DNA荧光-淬灭双标记)1OD/950元 HC80202-06 Cas14a检测系统用双标记探针(DNA Biotin和FAM双标记)1OD/1150元 RAA/RPA试剂盒推荐: HP90206-48 RT-RAA核酸扩增试剂盒(试剂条法) 相关Crispr/cas酶: 其他相关蛋白产品: SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike Protein (S1 Subunit, His Tag) SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike Protein (RBD, mFc Tag) 重组TEV蛋白酶 Recombinant TEV Protease 重组SUMO蛋白酶 Recombinant SUMO Protease 上海惠诚生物科技有限公司自2010年成立以来,一直致力于为客户提供试剂,仪器设备和耗材一站式服务。目前在苏州和南通的研发生产基地,专注于体外诊断蛋白,靶标蛋白,工业用酶和细胞因子的生产和定制,按照GMP标准,为工业客户提供大包装蛋白原料。 更多产品请联系惠诚生物! 蛋白原料网站:www.acediag.com 全国统一服务热线:021- 60496554 24小时手机服务: 13917250134(同微信)QQ:1715451510 Email:info@e-biochem.com |