服务热线
021-60498804
| Cat. Number | HC3011 HC3111 HC30112 HC5011 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Chemical Name | HC3011 T7高产量RNA合成试剂盒 T7共转录加帽试剂盒 T7 Co-transcription RNA Synthesis Kit |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Qty 1 |
50T |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| References | T7高收率RNA合成试剂盒优化转录反应体系，利用T7 RNA聚合酶，以T7启动子序列为模板的线性双链DNA，以NTPs为底物控制启动子下游DNA序列，高效合成单链RNA。在转录过程中，修饰过的核苷酸可以加入底物中制备生物素或染料标记RNA。T7 Co-transcription RNA Synthesis Kit 进行了转录反应体系的优化，试剂盒使用T7 RNA聚合酶并以含有T7启动子序列的线型双链DNA为模板，以NTPs为底物，对启动子下游的DNA序列进行转录，高效合成单链RNA。转录时可在底物中加入修饰的核苷酸，制备生物素或染料标记的RNA。咨询订购热线：021-60498804
T7共转录加帽试剂盒以共转录方式合成长转录本或短转录本，1μg的模板投入量可以产生150-200μg的RNA，转录合成的RNA可用于诸如RNA结构与功能研究、RNA酶保护、探针杂交、RNAi、显微注射及体外翻译等多方面的下游应用。 产品信息：
产品组分： T7 RNA Polymerase Mix、10xTranscription Buffer、ATP/CTP/GTP/N1-Me-PUTP、CAP GAG、质粒DNA模板 试剂盒中帽类似物可进行选择，惠诚生物可提供帽类似物:CAP GAG、CAP GAG (3'OMe)、CAP GAU、CAP GAG(m6A)以及新型帽类似物CAP4、CAP5、CAP7、CAP8、CAP 等 以下成分以EasyCаp™ GAG m7G(5')ppp(5')(2'OMeA)pG 100mM Ammonium solution, GMP grade 货号:CAP3011为例：
T7共转录加帽试剂盒应用： 体外RNA合成 T7共转录加帽试剂盒产品特点: 1)一步法化学加帽 一步到位，合成结束，可直接纯化 2)严格的质量管理规范 无残留 3)产生的mRNA活性更高 质量控制： 纯度≥95%，宿主DNA残留≤100pg/mg，宿主蛋白残留≤50ppm，内毒素残留≤10EU/mg，无RNA酶、核酸内切酶、核酸外切酶、蛋白酶残留，无菌，无病原体。 运输和存储： 干冰运输。-20℃保存，有效期两年。 反应体系（仅供参考）：
注意:反应在室温下进行，由于10×转录缓冲液中含有亚精胺，亚精胺浓度过高会导致DNA模板在低温下沉淀。 备注: 1. 注意不要在反应系统中混入RNase。 2. 实验设备(如:移液器尖端、产品管等)应严格使用RNase Free产品。 3.为了您的安全与健康，请穿白大褂，戴一次性手套。 4. 仅供研究使用! 常见问题解答： 1. 转录产量低 模板的质量与成品率密切相关。试验组的产量显著低于对照组，可能的原因有:①实验模板含有抑制成分;模板有问题。 建议:①重新纯化模板;②确定模板定量及其完整性;③延长反应时间;④增加模板输入量;⑤尝试其他启动子和RNA聚合酶。 2. 短转录产量低 短转录起始片段会抑制该反应。当转录产物小于100 nt时，延长反应时间至4-8 hs或增加模板量至2 μg均可提高RNA产量。 3.RNA转录长度大于预期 如果电泳显示产物条带大于预期条带，可能的原因是:①质粒模板可能没有完全线性化;②感觉链3’端结构突出;③RNA具有未完全变性的二级结构。 建议:①检查模板是否完全线性化，必要时进行额外线性化;②选择合适的限制性内切酶，避免3'外翻，或使用Klenow Fragment /T4 DNA聚合酶完成转录后再继续;③用变性凝胶检测RNA产物。 4. RNA转录长度低于预期 如果电泳显示产物条带小于预期大小，可能的原因是:①模板中含有类似于T7 RNA聚合酶的终止序列;②模板中GC含量较高。 建议:①降低反应温度(如30℃)。有时降低温度可以增加转录长度，但会降低产量。或者尝试不同的RNA聚合酶进行转录;②若模板GC含量较高，可采用42℃转录，或添加SSB以增加产量和转录长度。 5. 转录产物的电泳跟踪 电泳过程中出现拖尾现象。可能原因:①实验操作过程中被RNase污染;②RNase污染DNA模板。 建议:①使用不含RNase的移液针尖和EP管，佩戴一次性乳胶手套和口罩，所有试剂均使用不含RNase的H2O制备。②重新纯化模板DNA。 相关探针产品推荐： mRNA 帽子类似物 Cаp GAG GAG (3'OMe) Cap GAU CAP 5 HC80202-01 Crispr Cas12a检测系统用荧光双标记探针（DNA荧光-淬灭双标记） 1OD/950元 HC80202-02 Crispr Cas13a检测系统用荧光双标记探针（RNA荧光-淬灭双标记） 1OD/950元 HC80202-03 Crispr Cas13a检测系统用双标记探针（RNA Biotin和FAM双标记） 1OD/1350元 HC80202-04 Crispr Cas12a检测系统用双标记探针（DNA Biotin和FAM双标记）1OD/1150元 HC80202-05 Cas14a检测系统用荧光双标记探针（DNA荧光-淬灭双标记）1OD/950元 HC80202-06 Cas14a检测系统用双标记探针（DNA Biotin和FAM双标记）1OD/1150元 RAA/RPA试剂盒推荐： HP80206 试纸条型RT-RAA核酸扩增试剂（冻干颗粒） 相关Crispr/cas酶： 其他相关蛋白产品： SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike Protein (S1 Subunit, His Tag) SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike Protein (RBD, mFc Tag) 重组TEV蛋白酶 Recombinant TEV Protease 重组SUMO蛋白酶 Recombinant SUMO Protease 上海惠诚生物科技有限公司自2010年成立以来，一直致力于为客户提供试剂，仪器设备和耗材一站式服务。目前在苏州和南通的研发生产基地，专注于体外诊断蛋白，靶标蛋白，工业用酶和细胞因子的生产和定制，按照GMP标准，为工业客户提供大包装蛋白原料。 更多产品请联系惠诚生物！ 蛋白原料网站：www.acediag.com 全国统一服务热线：021- 60496554 24小时手机服务: 13917250134（同微信）QQ：1715451510 Email：info@e-biochem.com
<td width="350.3333333333333" style="-webkit-tap-highlight-color: |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Copyright © 2022 上海惠诚生物科技有限公司
沪ICP备2021037845号-6
