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Cat. Number
HP90207-96
Chemical Name
HP90207-96 RPA扩增试剂盒
Qty 1
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References

RPA扩增试剂盒能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测该技术对硬件设备的要求很低,特别适合用于体外诊断、兽医、食品安全、生物安全、农业等领域。用于逆转录反应,CDNA快速扩增. 除基本组分外, 还加有通用的逆转录酶,但不含Rnase抑制剂。


RPA试剂盒特点:

速度—— 检测时间 15 分钟以内;
敏感度—— 单分子检测,不需要  thermocyler ;
简单—— 稳定的冻干试剂,几乎没有硬件要求的可靠等温技术。


RPA(recombinase polymerase amplification)即重组酶聚合酶扩增技术,在ATP存在条件下,重组酶与引物结合, 形成蛋白-核酸聚合体,并搜索配对目标;当引物寻找到配对DNA模板,ATP水解供应能量,重组酶离开引物,并在DNA聚合酶的作用下合成新DNA链;同时,单链DNA结合蛋白(singlestrandedDNA binding, SSB)同被置换出来的DNA单链进行结合,防止DNA模板再次形成双链。RPA与与PCR实验相比,RPA实验能在恒定温度下进行全程实验,没有复杂的操作,对仪器及人员的要求不高,适合基层或现场快速诊断。

RPA和PCR区别.png

RPA原理:

  • 3种关键酶或蛋白:重组酶、单链结合蛋白和DNA聚合酶;

  • 在37℃恒温下进行核酸快速扩增;

  • RPA的重组酶来源于T4噬菌体。

重组酶,recombinase,同引物形成蛋白-核酸复合物,指导引物与模板结合,起到定位作用;帮助DNA 模板的解链和促使模板与引物之间发生链替换。

单链DNA结合蛋白,SSB, single stranded DNA binding,同置换出来的单链DNA结合,防止DAN配对两条链再次结合。

DNA聚合酶,DNA polymerase,以DNA为模板,利用dNTP合成子代DNA。


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