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Cat. Number
HC80201-01
Chemical Name
HC80201-01 Cas9 sgRNA设计合成与纯化
Qty 1
1套
References

Cas9 sgRNA设计合成与纯化

RISPR/Cas9可以说是近几年来生物医学领域最火的技术了,自2013年诞生以来就光芒四射,给生物医学领域带来巨大冲击,CRISPR/Cas9相关的科研成果频频登上顶尖期刊,国内CRISPR/Cas9相关的研究也是如火如荼。


CRISPR-Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的 sgRNA(guide RNA)来识别目的基因组序列,并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链,形成双链断裂,损伤后修复会造成基因敲除或敲入等,最终达到对基因组DNA 进行修饰的目的。使用CRISPR/Cas9编辑基因成败的关键就在于sgRNA。sgRNA是一个短的合成RNA,只有20bp大小,可以与Cas9蛋白结合,所以在设计sgRNA之前,应在基因组上寻找PAM序列(PAM:Protospacer Adjacent Motif),PAM序列是有固定形式的,来自于不同菌种属的Cas,它的PAM序列形式是不一样的。PAM序列应该为-NGG的形式,“N”可以是A,T,C,G中的任何一个。Cas 9其实就相当于是限制性核酸内切酶,使PAM序列前形成DSB(Double Strand Break)。所以,sgRNA其实相当于是向导,告诉Cas 9蛋白在哪进行切割。


sgRNA为体外合成的高纯度RNA,可与Cas9蛋白质结合形成复合物,通过电转、脂质体转染、显微注射等方式导入细胞,以核定位信号肽NLS进入细胞核,进行基因编辑。


上海惠诚生物提供Cas9 sgRNA设计合成与纯化。


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