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Cat. Number
HA11965
Chemical Name
HA11965蛋白预制胶 Bis-Tris 12%, 15孔, 1.5mm(玻璃胶盒)
Qty 1
10片/盒
References

产品简介:

玻璃胶盒Bis-Tris gel 是一款安全、快捷、高性能的预制聚丙烯酰胺凝胶,MOPS buffer 和MES buffer 组合使用,更好的实现中大分子量蛋白和小分子量蛋白的分离。

 采用自动化的灌胶生产技术,确保了产品质量的高稳定性和重复性。

 采用玻璃胶板,有效减少蛋白非特异性吸附,使蛋白条带更为敏锐,清晰。

 电泳时间短,在150V 电压下,电泳40-50 分钟即可完成。

 胶夹打开极为轻松,只需用刀片在胶夹一侧轻轻划一下即可打开。

 凝胶中不含SDS, 可用于变性和非变性电泳。

 兼容市场上主流的mini 电泳槽,如Bio-Rad, Invitrogen, 天能和君意东方等

 提供多种浓度的均一胶和梯度胶。

均一胶可选浓度:8%,10%,12%,15%。

梯度胶可选浓度:4-12%,4-20%。也可以提供特殊浓度的定制服务。

注:使用荧光上样缓冲液处理过的样品,无需剥胶,无需经过染色脱色处理,即可直接在紫外灯或者LED 灯下观察到蛋白条带。


基本信息:

胶板尺寸:宽×高×厚度为98×84×4.1mm;

凝胶尺寸为:宽×高×厚度为81×74×1.5mm;

丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例:29:1;

浓缩胶:4%,1.5cm;

凝胶厚度:1.5mm;

孔数:10 孔,15 孔;

最大上样量:60μL,30μL;

包装:10 片/盒。


预制胶选择指导:

产品编号浓度孔数最大上样量电泳缓冲液分离范围建议电压
HA119608%10孔60μLMOPS/MESTris-Bicin150V
HA119618%15孔30μLMOPS/MESTris-Bicin150V
HA1196210%10孔60μLMOPS/MESTris-Bicin150V
HA1196310%15孔30μLMOPS/MESTris-Bicin150V
HA1196412%10孔60μLMOPS/MESTris-Bicin150V
HA1196512%15孔30μLMOPS/MESTris-Bicin150V
HA1222715%10孔60μLMOPS/MESTris-Bicin150V
HA1222815%15孔30μLMOPS/MESTris-Bicin150V
HA119664-12%10孔60μLMOPS/MESTris-Bicin150V
HA119674-12%15孔30μLMOPS/MESTris-Bicin150V
HA122304-20%10孔60μLMOPS/MESTris-Bicin150V
HA122314-20%15孔30μLMOPS/MESTris-Bicin150V

非变性胶(Native-PAGE)使用说明:

1.非变性胶的蛋白迁移率受到蛋白分子量、蛋白空间结构等多种因素影响。

2.将GLASS Gel Bis-Tris gel 预制胶从包装袋中取出。

3.将预制胶固定在电泳槽中。

4.准备非变性电泳缓冲液:该产品含1 包电泳缓冲液粉末,每包粉末可用500mL ddH2O(去离子水)进行溶解,得到500mL 10X 电泳液。取50mL 母液,加450mL ddH2O,得到500mL 1X 电泳缓冲液。

5.内槽加满电泳液,外槽的电泳液最低须加到1/3 液面处,最高不可漫过胶板,再缓慢地将梳子拔出。

6.上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的胶液。

7.上样:将非变性蛋白样品与5X 非变性loading buffer(ES005)进行4:1 混合均匀。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。

8.电泳条件:150 V, 60 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。

9.电泳结束,取出凝胶。用刀在侧边硅胶处,沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料,即可打开玻璃板,取胶时,需在凝胶和玻璃条之间,沿着玻璃条划一刀,防止取胶时,发生粘连使胶破碎。(使用美工刀时请注意安全)

10.酸性蛋白(等电点pI<7)正常上样电泳即可。反之,碱性蛋白(等电点pi>7)带正电荷,需将电极插反(红插黑,黑插红),这时上样孔成为正极,样品向下电泳。


变性胶(SDS-PAGE)使用说明:

1.请参考分离谱图选择合适浓度的预制胶,以帮助您进行更好的蛋白电泳条带分离。

2.将GLASS Gel Bis-Tris gel 预制胶从包装袋中取出。

3.将预制胶固定在电泳槽中。

4.准备电泳缓冲液:该产品含1 包电泳缓冲液粉末,每包粉末可用500mL ddH2O(去离子水)进行溶解,得到500mL 10X 电泳液。取50mL 母液,加450mL ddH2O,得到500mL 1X 电泳缓冲液。

5.内槽加满电泳液,外槽的电泳液最低须加到1/3 液面处,最高不可漫过胶板,再缓慢地将梳子拔出。

6.上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的胶液。

7.上样:将蛋白样品与5X 变性loading buffer进行4:1 混合均匀,加热处理。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。

8.电泳条件:150 V, 40~50 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。

9.电泳结束,取出凝胶。用刀在侧边胶处,沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料,即可打开玻璃板,取凝胶时,需在凝胶和玻璃条之间,沿着玻璃条划一刀,防止取胶时,发生粘连使胶破碎。(使用美工刀时请注意安全)


产品运输和保存:

1.常温运输,常温保存时应放置于阴凉处,避免温度剧烈变化和阳光直射。

2.4-8℃保存,可以存放12 个月。

3.请勿置于0℃以下,凝胶在0℃以下会冻凝,产生气泡和裂纹,凝胶报废。


拆胶:

1.先沿侧边胶处简单划一刀(或先将玻璃板侧边多余封胶材料去除);

2.用刀在侧边胶处,沿着玻璃板和玻璃条的缝隙切开封胶材料(箭头处),轻轻打开玻璃板;

3.取胶时,需在凝胶和两侧玻璃条之间沿着玻璃条划一刀,防止取胶时发生粘连使凝胶破碎。



玻璃胶盒兼容的电泳槽:

玻璃胶盒系列预制胶可以兼容大部分的mini SDS-PAGE 电泳槽,包括

a.Bio-Rad Mini-PROTEAN (II/3 /Tetra System)

b.Hoefer Mighty Small (SE 250/ SE 260/ SE 280)

c.Life Technology Novex Mini-Cell (请与特制挡板配合使用)

d.北京六一DYCZ-25E、DYCZ-24K、DYCZ-24KS、DYCZ-24KF

e.君意东方JY-SCZ2+

f.天能VE180或其它胶板宽度在10 厘米的电泳槽


在Life Technology Novex 电泳槽中的应用:

由于玻璃胶盒系列 系列预制胶比Invitrogen NuPAGE 预制胶略薄,所以需要特制的挡板,使得该系列预制胶能够适用于Life TechnologyNovex 电泳槽。如有需要,请在订购本产品时告知。


在Bio-Rad 电泳槽中的应用:

Bio-Rad Mini-PROTEAN 系列电泳槽的U 型密封条顶部有突起结构,而玻璃胶盒系列系列预制胶的短玻板是凹形结构,因此该部位是平的,电泳前需将具有突起结构的密封条取出后反过来安装,是平滑面朝外,从而防止漏液(如下图所示)。另有厚度约为0.5mm 的塑料垫片,请根据您电泳槽的实际宽度进行相应的增加。

a.将Bio-Rad 电泳槽中的U 型密封条(如图绿色部分) 拉出,注意这时的密封条两端是有突起的,突起的这面为正面,无突起的为反面。

b.将密封条旋转180 度(正面朝里,反面朝外),重新装回电泳槽中,注意把密封圈周边压实,防止发生漏液。

c.放置好预制胶进行正常的电泳操作即可。


注意事项:

1.Bis-tris gel预制胶使用的是MOPS 或者MES 缓冲系统,请勿使用Tris-Gly 等其他电泳缓冲液进行电泳。

1.1.使用专门配制的MOPS 电泳缓冲液;

1.2.使用专门配制的MES 电泳缓冲液;

2.如果需要蛋白条带更加清晰、平直,可降低电压至100-120V, 适当延长电泳时间。

3.电压为150V 时,1 块胶的电流在80mA 左右,2 块胶的电流在140mA 左右,随时间增加电流逐步降低。

4.如要重复使用电泳缓冲液, 建议每次更换内槽电泳缓冲液, 外槽根据电泳实际情况更换。为了保证最佳电泳效果,不建议重复使用电泳缓冲液。

5.湿转时120V 恒压转膜60-90min。为达到更好的转膜效果,可以根据预制胶上残留的预染marker 及膜上的预染marker 确定转膜效率,并对转膜条件进行适当调整。目的蛋白的分子量,凝胶浓度及转膜液中的甲醇浓度都会影响转膜效率。大蛋白尽量选择低浓度的胶。蛋白分子量100kDa 以上10-100kDa 10kDa 以下建议甲醇浓度5% 10% 20%-30%

6.电泳结束后可以使用Tris-Bicine 转膜液进行转膜。将凝胶浸泡在转膜液中10-15min, 使凝胶中的缓冲

液得到充分平衡,再进行转膜。

7.上样时枪头不要过度插入梳孔,以免戳破凝胶造成漏液。

8.如需分离<10 kDa 的蛋白,建议可以使用Cat#:HA11942尝试。如要确保电泳结果, 建议使用Cat#:

HA11982,Tricine 体系预制胶。

9.仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

10.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。



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