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/ Products Classification 点击展开+Cat. Number | HA11936 |
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Chemical Name | HA11936蛋白预制胶 Tris-Gly 12%, 10孔, 1.5mm(玻璃胶盒) |
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Qty 1 |
10片/盒 |
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References | 产品简介: 玻璃胶盒Tris-Gly gel 是一款安全、快捷、高性能的预制聚丙烯酰胺凝胶,常用于PAGE 和Western blot 检测。
均一胶可选浓度:6%,8%,10%,12%,15%。 梯度胶可选浓度:4-15%,4-20%。也可以提供特殊浓度的定制服务。 注:使用荧光上样缓冲液处理过的样品,无需剥胶,无需经过染色脱色处理,即可直接在紫外灯或者LED 灯下观察到蛋白条带。配合超快电泳缓冲液使用,可在半个小时内完成样品处理、电泳、拍照的全部过程, 获得理想的电泳结果。 基本信息: 胶板尺寸:宽×高×厚度为98×84×4.1mm; 凝胶厚度:1.5mm; 凝胶尺寸为:宽×高×厚度为81×74×1.5mm; 孔数:10 孔,15 孔; 丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例:29:1; 最大上样量:60μL,30μL; 浓缩胶:4%,1.5cm; 包装:10 片/盒。 预制胶选择指导:
使用说明: 预制胶本身都不含SDS,可根据电泳缓冲液的不同用于变性电泳和非变性电泳。 非变性胶(Native-PAGE) 1.非变性胶的蛋白迁移率受到蛋白分子量、蛋白空间结构等多种因素影响。 2.将GLASS Gel Tris-Gly gel 预制胶从包装袋中取出。 3.将预制胶固定在电泳槽中。 4.准备非变性电泳缓冲液:该产品含1 包电泳缓冲液粉末,每包粉末可用500mL ddH2O(去离子水)进行溶解,得到500mL 10X 电泳液。取50mL母液,加450mL ddH2O,得到500mL 1X 电泳缓冲液。 5.内槽加满电泳液,外槽的电泳液最低须加到1/3 液面处,最高不可漫过胶板,再缓慢地将梳子拔出。 6.上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的胶液。 7.上样:将非变性蛋白样品与5X 非变性loading buffer进行4:1 混合均匀。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。 8.电泳条件:180 V, 60 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。 9.电泳结束,取出凝胶。用刀在侧边胶处,沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料,即可打开玻璃板,取胶时,需在凝胶和玻璃条之间,沿着玻璃条划一刀,防止取胶时,发生粘连使胶破碎。(使用美工刀时请注意安全) 10.酸性蛋白(等电点pI<7)正常上样电泳即可。反之,碱性蛋白(等电点pi>7)带正电荷,需将电极插反(红插黑,黑插红),这时上样孔成为正极,样品向下电泳。 变性胶(SDS-PAGE) 1.请参考下面的分离图谱选择合适浓度的预制胶,以帮助您进行更好的蛋白电泳条带分离。 2.将GLASS Gel Tris-Gly gel 预制胶从包装袋中取出。 3.将预制胶固定在电泳槽中。 4.准备电泳缓冲液:该产品含1 包电泳缓冲液粉末,每包粉末可用500mL ddH2O(去离子水)进行溶解,得到500mL 10X 电泳液。取50mL 母液,加450mL ddH2O,得到500mL 1X 电泳缓冲液。 5.内槽加满电泳液,外槽的电泳液最低须加到1/3 液面处,最高不可漫过胶板,再缓慢地将梳子拔出。 6.上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的胶液。 7.上样:将蛋白样品与5X 变性loading buffer进行4:1 混合均匀,加热处理。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。 8.电泳条件:180 V, 60 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。 9.电泳结束,取出凝胶。用刀在侧边胶处,沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料,即可打开玻璃板,取胶时,需在凝胶和玻璃条之间,沿着玻璃条划一刀,防止取胶时,发生粘连使胶破碎。(使用美工刀时请注意安全) 预制胶分离图谱(变性): 拆胶: 1.先沿侧边胶处简单划一刀(或先将玻璃板侧边多余封胶材料去除); 2.用刀在侧边胶处,沿着玻璃板和玻璃条的缝隙切开封胶材料(箭头处),轻轻打开玻璃板; 3.取胶时,需在凝胶和两侧玻璃条之间沿着玻璃条划一刀,防止取胶时发生粘连使凝胶破碎。 产品运输和保存: 1.常温运输,常温保存时应放置于阴凉处,避免温度剧烈变化和阳光直射。 2.4-8℃保存,可以存放12 个月。 3.请勿置于0℃以下,凝胶在0℃以下会冻凝,产生气泡和裂纹,凝胶报废。 GLASS Gel 兼容的电泳槽: GLASS Gel 系列预制胶可以兼容大部分的mini SDS-PAGE 电泳槽,包括 a.Bio-Rad Mini-PROTEAN (II/3 /Tetra System) b.Hoefer Mighty Small (SE 250/ SE 260/ SE 280) c.Life Technology Novex Mini-Cell (请与特制挡板配合使用) d.北京六一DYCZ-25E、DYCZ-24K、DYCZ-24KS、DYCZ-24KF e.君意东方JY-SCZ2+ f.天能VE180 g.或其它胶板宽度在10 厘米的电泳槽 在Life Technology Novex 电泳槽中的应用: 由于GLASS Gel 系列预制胶比Invitrogen NuPAGE 预制胶略薄,所以需要特制的挡板,使得该系列预制胶能够适用于Life TechnologyNovex 电泳槽。如有需要,请在订购本产品时告知。 在Bio-Rad 电泳槽中的应用: Bio-Rad Mini-PROTEAN 系列电泳槽的U 型密封条顶部有突起结构,而GLASS gel 系列预制胶的短玻板是凹形结构,因此该部位是平的,电泳前需将具有突起结构的密封条取出后反过来安装,是平滑面朝外,从而防止漏液(如下图所示)。另有厚度约为0.5mm 的塑料垫片,请根据您电泳槽的实际宽度进行相应的增加。 a.将Bio-Rad 电泳槽中的U 型密封条(如图绿色部分) 拉出,注意这时的密封条两端是有突起的,突起的这面为正面,无突起的为反面。 b.将密封条旋转180 度(正面朝里,反面朝外),重新装回电泳槽中,注意把密封圈周边压实,防止发生漏液。 c.放置好预制胶进行正常的电泳操作即可。 注意事项: 1.Tris-Gly gel 预制胶使用的是中性的Tris-Gly 缓冲系统。 1.1.使用我司超快电泳缓冲液,250V 仅需20min 即可完成电泳; 1.2.使用tris-gly 变性缓冲液或非变性缓冲液,180V,60min; 2.如果需要蛋白条带更加清晰、平直,可降低电压至150V, 适当延长电泳时间。 3.电压为180V 电泳时,1 块胶的电流在75mA 左右,2 块胶的电流在150mA 左右,随时间增加电流逐步降低。 4.电泳缓冲液不建议重复使用。因为经过电泳之后,缓冲液中的离子强度、缓冲能力都发生了变化,不能确保电泳效果。 5.湿转时120V 恒压转膜60-90min。为达到更好的转膜效果,可以根据预制胶上残留的预染marker 及膜上的预染marker 确定转膜效率,并对转膜条件进行适当调整。目的蛋白的分子量,凝胶浓度及转膜液中的甲醇浓度都会影响转膜效率。
6.电泳结束后可以使用Tris-Gly 转膜液进行转膜。将凝胶浸泡在转膜液中10-15min, 使凝胶中的缓冲液得到充分平衡,再进行转膜。 7.上样时枪头不要过度插入梳孔,以免戳破凝胶造成漏液。 8.如需分离<10 kDa 的蛋白,建议可以使用HA11942尝试。如要确保电泳结果, 建议使用Cat#:HA11982,Tricine 体系预制胶。 9.仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 10.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
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