产品简介：

塑料胶盒Hepes-Tris gel 是一款安全、快捷、高性能的预制聚丙烯酰胺凝胶，常用于PAGE 和Western blot 检测。

• 采用自动化的灌胶生产技术，确保了产品质量的高稳定性和重复性。

• 采用镀膜塑料胶板，有效减少蛋白非特异性吸附，使蛋白条带更为敏锐，清晰。

• 电泳时间短，在150V 电压下，电泳40-50 min 即可完成。

• 胶夹打开极为轻松，塑料板可以用起翘工具撬开。

• 凝胶中不含SDS, 可用于变性和非变性电泳。

• 兼容市场上主流的mini 电泳槽，如Bio-Rad, 天能和君意东方等。

• 提供多种浓度的均一胶和梯度胶。

均一胶可选浓度：6%，8%，10%，12%，15%。

梯度胶可选浓度：4-15%，4-20%。也可以提供特殊浓度的定制服务。

基本信息：

胶板尺寸：宽×高×厚度为100*89*4.8mm； 凝胶厚度：1.0mm；

凝胶尺寸为：宽×高×厚度为84*74*1mm； 孔数：10 孔，15 孔；

丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例：29：1； 最大上样量：30μL，50μL

浓缩胶：4%，1.5cm； 包装：10 片/盒。

预制胶选择指导：

使用说明：

预制胶本身都不含SDS，可根据电泳缓冲液的不同用于变性电泳和非变性电泳

非变性胶（Native-PAGE）

1.非变性胶的蛋白迁移率受到蛋白分子量、蛋白空间结构等多种因素影响。

2.将Precast Gels Plus Hepes-Tris gel 预制胶从包装袋中取出，撕掉底部密封胶带。

3 将预制胶固定在电泳槽中。

4.准备非变性电泳缓冲液：该产品含10 包电泳缓冲液粉末，每包粉末可用500mL ddH2O（去离子水）进行溶解，得到500mL 1X 电泳液。

5.阴极加满电泳液，阳极的电泳液最低须加到1/3 液面处，最高不可漫过胶板，再缓慢地将梳子拔出。

6.上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔，去除加样孔内残余的胶液。

7.上样：将非变性蛋白样品与5X 非变性loading buffer进行4：1 混合均匀。注意枪头不要戳破凝胶，不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。

8.电泳条件：150V, 60 min，当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部，或实验预定位置时，即可结束电泳。

9.电泳结束，取出凝胶。用起翘器在板子侧边缘慢慢撬开板子，打开胶盒，轻轻取出凝胶。

10.酸性蛋白（等电点pI<7）正常上样电泳即可。反之，碱性蛋白（等电点pi>7）带正电荷，需将电极插反（红插黑，黑插红），这时上样孔成为正极，样品向下电泳。

变性胶（SDS-PAGE）

1.请参考分离图谱选择合适浓度的预制胶，以帮助您进行更好的蛋白电泳条带分离。

2.将Precast Gels Plus Hepes-Tris gel 预制胶从包装袋中取出，撕掉底部密封胶带。

3.将预制胶固定在电泳槽中。

4.准备电泳缓冲液：每盒胶赠送10 包电泳缓冲液粉末，每包粉末可用500mL ddH2O（去离子水）进行溶解，得到500mL 1X 电泳液。

5.阴极加满电泳液，阳极的电泳液最低须加到1/3 液面处，最高不可漫过胶板，再缓慢地将梳子拔出。

6.上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔，去除加样孔内残余的胶液。

7.上样：将蛋白样品与5X 变性loading buffer进行4：1 混合均匀，加热处理。注意枪头不要戳破凝胶，不要过度插入梳孔使胶板变型造成漏液。

8.电泳条件：150V, 40-50 min，当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部，或实验预定位置时，即可结束电泳。

9.电泳结束，取出凝胶。用起翘器在板子侧边缘慢慢撬开板子，打开胶盒，轻轻取出凝胶。

预制胶分离图谱（变性）：

产品保存和运输：

1.常温保存和运输。常温下可以存放12 个月。常温保存时应放置于阴凉处，避免温度剧烈变化和阳光直射。

2.4-8℃，可以存放18 个月。

3.请勿置于0℃以下，凝胶在0℃以下会冻凝，产生气泡和裂纹，凝胶报废。

Precast Gels Plus 兼容的电泳槽:

Precast Gels Plus 系列预制胶可以兼容大部分的mini SDS-PAGE 电泳槽，包括

a.Bio-Rad Mini-PROTEAN (II/3 /Tetra System)

b.Hoefer Mighty Small (SE 250/ SE 260/ SE 280)

c.Life Technology Novex Mini-Cell (请与特制挡板配合使用)

d.北京六一DYCZ-25E、DYCZ-24K、DYCZ-24KS、DYCZ-24KF

e.君意东方JY-SCZ2+

f.天能VE180

g.或其它胶板宽度在10 厘米的电泳槽

在Bio-Rad 电泳槽中的应用：

Bio-Rad Mini-PROTEAN 系列电泳槽的U 型密封条顶部有突起结构，而Precast Gels Plus 系列预制胶的短玻板是凹形结构，因此该部位是平的，电泳前需将具有突起结构的密封条取出后反过来安装，是平滑面朝外，从而防止漏液（如下图所示）。另有厚度约为0.5mm 的塑料垫片，请根据您电泳槽的实际宽度进行相应的增加。

a.将Bio-Rad 电泳槽中的U 型密封条（如图绿色部分） 拉出，注意这时的密封条两端是有突起的，突起的这面为正面，无突起的为反面。

b.将密封条旋转180 度(正面朝里，反面朝外)，重新装回电泳槽中，注意把密封圈周边压实，防止发生漏液。

c.放置好预制胶进行正常的电泳操作即可。

注意事项：

1.Hepes-tris gel 预制胶使用的是中性的Hepes 缓冲系统，请勿使用Tris-Gly 等其他电泳缓冲液进行电泳。推荐使用专门配制的变性Hepes Running Buffer或非变性Hepes Running Buffer

2.如果需要蛋白条带更加清晰、平直，可降低电压至100-120V, 适当延长电泳时间。

3.电压为150V 电泳时，1 块胶的电流在110mA 左右，2 块胶的电流在220mA 左右，随时间增加电流逐步降低。

4.如要重复使用电泳缓冲液，建议每次更换内槽电泳缓冲液，外槽根据电泳实际情况更换。为了保证最佳电泳效果，不建议重复使用电泳缓冲液。

5.湿转时120V 恒压转膜60-90min。为达到更好的转膜效果，可以根据预制胶上残留的预染marker 及膜上的预染marker 确定转膜效率，并对转膜条件进行适当调整。目的蛋白的分子量，凝胶浓度及转膜液中的甲醇浓度都会影响转膜效率。大蛋白尽量选择低浓度的胶。

6.电泳结束后可以使用Tris-Gly 转膜液进行转膜。将凝胶浸泡在转膜液中10-15min, 使凝胶中的缓冲液得到充分平衡，再进行转膜。

7.上样时枪头不要过度插入梳孔，以免戳破凝胶造成漏液。

8.如需分离<10 kDa 的蛋白，建议可以使用Cat#：HA11927尝试。如要确保电泳结果， 建议使用Cat#：HA11982，Tricine 体系预制胶。

9.仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

10.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。