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| Cat. Number | HA11620 |
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| Chemical Name | HA11620 SpCas9 |
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| Qty 1 |
100pmol |
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| Qty 2 | 1000pmol |
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| Storage condition | -20℃ |
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| References | SpCas9 来源于 S. pyogenes 菌株，是依赖于 crRNA 和 tracrRNA(或连接后形成的 sgRNA)引导的 DNA 内切核酸酶，在靶标双链 DNA 存在 PAM(NGG)的情况下，特异地剪切靶标双链 DNA，使 DNA 双链断裂 并生成平末端。PAM 对于 Cas9 的识别和剪切都是必需的，其剪切位点位于目标序列(target sequence)内， 离 PAM 区 3 个碱基。此外，在 PAMmer 序列存在时，SpCas9 也能特异地剪切单链 DNA 或 RNA(详细信 息请参考 PMID: 24476820；PMID: 25274302)。此酶还可应用于体外靶标 DNA 的剪切、目的片段的克隆等 实验(详细信息可参考 PMID: 26323354) 。 产品组成 SpCas9 Nuclease (10 μM) 100 pmol 10 × Buffer 3 1mL Control Target DNA and sgRNA 5 μL 注：1. SpCas9 Nuclease 浓度为 10 μM，即 10 pmol/μL，100 pmol 规格的总体积为 10 μL，1,000 pmol 规格的总体积为 100 μL； 2. Control Target DNA and sgRNA 应保存于-80℃并避免反复冻融，必须在 6 个月内使用，使用时建议取 0.5 μL 至每 20 μL 反应体系 实验流程 1. 顺式剪切实验
若用核酸电泳来分析顺式剪切产物，对于 20 μL 顺式剪切应体系，推荐 target DNA的使用量为 100 ng～500 ng，且 target DNA片段 长度在 300 bp～3 kb 范围内。不同长度 target DNA 需要的 Cas 酶和 sgRNA 的量需要根据 target DNA 的摩尔量计算，建议保持 Cas 酶:sgRNA:target DNA的摩尔比为 10:10:1，以尽量确保 target DNA被剪切完全。 37℃反应 30 min~1 h，85℃灭活 5 min。核酸电泳分析顺式剪切产物。 实验结果
注意事项 1. 为防止 RNase 污染，请保持实验区干净整洁，操作时需穿戴干净的手套、口罩，实验所用枪头、离心管等耗材均为 RNase-free。 2. 因反应需添加 RNA(sgRNA 或者 crRNA:tracrRNA)，整个体系，包括 Cas9 酶都必需不含任何 RNase 活性。本产品经过严格质控，无任何其它核酸酶污染。 3. Cas9 酶对热敏感，容易失活，应全程冰上配置反应体系，使用后立即置于-20℃保存。 4. Cas9 酶与 DNA、sgRNA 形成复合物会影响电泳，需 85℃高温失活 Cas9 酶后电泳检测。 5. 本产品仅供科研使用 相关探针产品推荐： HC80202-01 Crispr Cas12a检测系统用荧光双标记探针（DNA荧光-淬灭双标记） 1OD/950元 HC80202-02 Crispr Cas13a检测系统用荧光双标记探针（RNA荧光-淬灭双标记） 1OD/950元 HC80202-03 Crispr Cas13a检测系统用双标记探针（RNA Biotin和FAM双标记） 1OD/1350元 HC80202-04 Crispr Cas12a检测系统用双标记探针（DNA Biotin和FAM双标记）1OD/1150元 HC80202-05 Cas14a检测系统用荧光双标记探针（DNA荧光-淬灭双标记）1OD/950元 HC80202-06 Cas14a检测系统用双标记探针（DNA Biotin和FAM双标记）1OD/1150元 RAA/RPA试剂盒推荐： HP90206-48 RT-RAA核酸扩增试剂盒(试剂条法) 相关Crispr/cas酶： 其他相关蛋白产品： SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike Protein (S1 Subunit, His Tag) SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike Protein (RBD, mFc Tag) 重组TEV蛋白酶 Recombinant TEV Protease 重组SUMO蛋白酶 Recombinant SUMO Protease 上海惠诚生物科技有限公司自2010年成立以来，一直致力于为客户提供试剂，仪器设备和耗材一站式服务。目前在苏州和南通的研发生产基地，专注于体外诊断蛋白，靶标蛋白，工业用酶和细胞因子的生产和定制，按照GMP标准，为工业客户提供大包装蛋白原料。 更多产品请联系惠诚生物！ 蛋白原料网站：www.acediag.com 全国统一服务热线：021- 60496554 24小时手机服务: 13917250134（同微信）QQ：1715451510 Email：info@e-biochem.com
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