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Cat. Number
HK21643-48S
Chemical Name
HK21643-48S 组织无机磷含量测试盒(可见分光光度法)
Qty 1
50T/48S
References

磷是植物必需大量元素。植物主要通过根系从土壤中获取磷元素。土壤磷包括有机磷和无机磷。土壤有机磷经过矿化分解而转化为无机磷,才能进一步被植物吸收利用。

测定原理:
从土壤中提取无机磷,在酸性环境中,通过钼蓝法定磷。钼蓝法是测定无机磷含量的经典方法,使磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵。此化合物经对苯二酚、亚硫酸钠还原成兰色化合物--钼蓝,通过测定660nm光吸收,即可计算出无机磷含量。


需自备的试剂和器材:

 1.可见分光光度计/酶标仪

 2.37℃恒温箱

 3.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器

 4.去离子水或蒸馏水


产品组成:

试剂名称 规格 保存条件
试剂R1 液体×1 瓶2-8℃
试剂R2液体×1 瓶2-8℃
试剂R3粉剂×2 瓶 2-8℃
标准品液体×1 支2-8℃

 

实验步骤:

一、无机磷提取(具体比例可以参考文献) 

称取约 0.1g 组织,加试剂R1 1.0 mL 冰上充分匀浆,4℃,10000rpm,离心 10min,取上清液,待测。

二、试剂准备

溶液的配制: 

1、 试剂R3:临用前配制,加入10 mL 蒸馏水,充分溶解后加入 5mL 试剂R2,混匀; 

2、 标准品:1mmol/L 无机磷标准液。  

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。  

 三、样本测定

1.分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上,调节波长到 660 nm,蒸馏水调零。

2.打开水浴锅,调节温度到 40℃。 

3. 测定

试剂名称(μL)空白管 标准管测定管
标准液-50-
上清液--50
蒸馏水500450450
试剂R3500500500

混匀后置于 40℃水浴保温 10min,室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度,分别记为 A 空白管、A 标准管、A 测定管。(空白管和标准管只需测 1-2 次)。

注意:需在 40min 内完成比色。 

三、组织无机磷含量计算 

无机磷含量(mmol/g 质量) = [C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×V 总÷W 

C 标准液:1mmol/L;

V 总:上清液总体积;

W:样本质量,g。 


注意事项: 

1、试剂三需临用前配制,限当天使用。

 2、测定前先用 1~2 个样本做预实验,如吸光值大于 0.8,需用蒸馏水做相应稀释。


本试剂盒仅供科研使用!

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