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/ Products Classification 点击展开+Cat. Number | HK21642-96S |
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Chemical Name | HK21642-96S 总糖含量测试盒(酶标板法) |
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Qty 1 |
100T/96S |
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References | 糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖也可称为碳水化合物,主要指具有还原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖,麦芽糖以及可能部分水解的淀粉,包括可溶性的单糖,二糖以及不溶性的淀粉,纤维素,几丁质等。 测定原理: 需自备的试剂和器材: 1.可见分光光度计/酶标仪 2.37℃恒温箱 3.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器 4.去离子水或蒸馏水 产品组成:
实验步骤: 一、试剂准备 标准品:临用前加1mL蒸馏水溶解为10mg/mL的葡萄糖标准品备用,2-8℃可保存两周。 二、样本处理 1、组织样本的处理:称取约0.1g样本于10mLEP管中,加入1mL 试剂R1,1.5mL蒸馏水,研磨匀浆,沸水浴30min,加入1mL试剂R2,涡旋混匀,用蒸馏水定容至10mL,8000g,25℃离心10min,取上清液待测。(注意稀释)。 2、血清(浆)、液体样本的处理:取0.1mL 血清(浆)于1mLEP管中,加入0.1mL试剂R1,0.15mL 蒸馏水,匀浆,沸水浴30min,加入0.1mL 试剂R2,涡旋混匀,用蒸馏水定容至1mL,8000g,25℃离心10min,取上清液待测。(注意稀释)。 三、测定步骤 1、酶标仪/分光光度计预热 30min 以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。 2、标准品准备 将标准品用蒸馏水按梯度进行稀释。标准液稀释可参考下表:
备注:实验中每个标准管需30uL标准溶液。 3、加样表
涡旋混匀,在540nm下测定吸光值,分别记为A空白管、A测定管、A标准管。计算 △A测定=A测定管-A空白管、△A标准=A标准管-A空白管。标准曲线和空白管只需测1-2次。 四、总糖含量计算 1、标准曲线的绘制: 根据标准管的浓度(x,mo/mL)和吸光度△A标准(y,△A标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将△A测定(y,△A测定)带入公式计算样本浓度(x,mg/mL)。 2、按样本质量计算 总糖(mg/g质量)=(x*V样总)÷W*稀释倍数=10*x÷W*稀释倍数 3、按血清(浆)、液体体积计算 总糖(mg/mL)=(x*V提)÷V样*稀释倍数=10*x*稀释倍数 V样总:样本体积总体积,10mL; W:样本质量,g; V提:液体或血清样本总体积,1mL; V样:液体或 血清体积,0.1mL。 注意事项: 1、此试剂盒对千纤维素的分解程度无法达到100%。 2、如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。注意同步修改计算公式。 本试剂盒仅供科研使用! |
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