HK21640-48S 总巯基测试盒(酶标板法)_上海惠诚生物生物试剂,标准品,仪器设备,耗材,一站式服务

服务热线：13917250134「同微信」

您的位置：首页>>分析化学>>试剂盒>>HK21640-48S 总巯基测试盒(酶标板法)

产品中心

/ Products Classification 点击展开+

Cat. Number

HK21640-48S

Chemical Name

HK21640-48S 总巯基测试盒(酶标板法)

Qty 1

100T/48S

References

生物体内巯基主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质，而且参与活性氧清除，后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和GSH含量，能够间接测定蛋白质巯基含量。

检测原理：
巯基基团与5,5’- 二硫代-双-硝基苯甲酸(DTNB)反应，生成黄色化合物，在42nm处有最大吸收峰。

需自备的试剂和器材：

1.可见分光光度计/酶标仪

2.37℃恒温箱

3.系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，最好用多通道移液器

4.去离子水或蒸馏水

产品组成：

实验步骤：

注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1. 动物、植物组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：5~10 的比例（称取称取约0.1g 组织，加入1mL的提取液），冰浴匀浆，8000g，常温离心10min，取上清待测。

2. 血清，培养液：直接测定。若溶液有浑浊则离心后取上清进行测定。

二、试剂准备

标准品：10 mg 还原型谷胱甘肽（GSH）。临用前加入1.3 mL 蒸馏水，配制成25 μmol/mL，2-8℃保存两周。

三、测定步骤

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至412nm，分光光度计蒸馏水调零。

2、标准液的稀释：将25μmol/mL标准溶液用蒸馏水稀释至0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625μmol/mL

的标准液，现用现配。

3、标准液稀释可参考下表：

备注：实验中每个标准管需40μL 标准溶液。

4、操作表

试剂名称(uL)	对照管	测定管	标准管	空白管
样本	40	40	-	-
标准品	-	-	40	-
试剂R1	150	150	150	150
试剂R2	-	10	10	-
H2O	10	-	-	50
混匀，室温准确静置10min，测定412nm吸光值，分别记为A对照、A测定、A标准、A空白，并计算ΔA标准= A标准-A空白、ΔA测定= A测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。标准曲线和空白管只需测1-2次。