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/ Products Classification 点击展开+Cat. Number | HK21622-96S |
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Chemical Name | HK21622-96S 植物组织果糖含量测试盒(酶标板法) |
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Qty 1 |
100T/96S |
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References | 果糖是一种为常见的己酮糖,是葡萄糖的同分异构体,以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中,能与葡萄糖结合生成蔗糖。果糖是甜的单糖,广泛应用于食品、医药、保健品生产中。
需要的仪器,耗材: 1、可见分光光度计/酶标仪 2、台式离心机 3、可调式移液器 4、微量石英比色皿/96孔板 5、研钵、冰和蒸馏水。 产品组成:
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。 实验步骤: 一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献) 称取约 0.05g 样本,常温研碎;加入 0.5mL 提取液,适当研磨后快速转移到有盖离心管中;置于 80℃水浴锅 中 10min(盖紧,以防止水分散失),振荡 3~5 次,冷却至室温后,4000g,常温离心 10min,取上清;加入少量(约 2mg) 试剂四,80℃脱色 30min(盖紧,以防止水分散失);再加入 0.5mL 提取液,4000g,常温离心 10min,取上清液测定。 二、试剂准备 试剂R1:10mg 果糖。临用前加1mL 蒸馏水溶解,得到10mg/mL 的果糖标准液,2-8℃保存两周。 三、测定步骤 1、分光光度计或酶标仪预热30min 以上,调节波长至 480nm,分光光度计用蒸馏水调零。 2、试剂R1的稀释 取200μL 10mg/mL果糖标准液,加入300μL蒸馏水,充分混匀,配制成4mg/mL标准液使用,现用现配。 备注:实验中每管需要30μL,为减小实验误差,故配制大体积。 3、样本测定 在 1.5mL EP 管中依次加入下列试剂:
涡旋混匀,置于 80℃水浴锅中准确反应 10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温后取 200μL至微量玻璃比色皿或 96 孔板中测定 480nm 处光吸收值,记为 A 空白管、A 标准管、A 测定管,并计算 ΔA 测定=A 测定管-A 空白管、ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。标准管和空白管只需测 1-2 次。 四、果糖含量计算 1、按样本蛋白浓度计算 果糖含量(mg/mg prot)=C标×ΔA测定÷ΔA标准×V样总÷(Cpr×V样总) 2、按样本质量计算 果糖含量(mg/g 质量)=C标×ΔA测定÷ΔA标准×V样总÷W C标准管:标准管浓度; V样总:加入提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样 本质量,g。 注意事项: 如果样本吸光值大于1.1,建议将样本用提取液稀释后进行测定。计算公式中注意乘以稀释倍数。 本试剂盒仅供科研使用! |
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