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Cat. Number
HK21616-96S
Chemical Name
HK21616-96S 植物蔗糖含量测试盒(酶标板法)
Qty 1
100T/96S
References

蔗糖是植物光合作用的主要产物,也是糖分运输和储藏的主要形式。因此,测定蔗糖含量对于植物糖代谢具有重要意义。此外,蔗糖含量是饮料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等产品质量控制的重要指标之一。

测定原理:
酸性条件下蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,果糖进一步与间苯二酚反应,生成有色物质,在480nm下有特征吸收峰。


需要的仪器,耗材:

1、可见分光光度计/酶标仪

2、台式离心机

3、可调式移液器

4、微量石英比色皿/96孔板

5、研钵、冰和蒸馏水。


产品组成:

试剂名称规格保存条件
提取液液体×1 瓶2-8℃
试剂R1液体×1 瓶2-8℃
试剂R2液体×1 瓶2-8℃
试剂R3液体×1 瓶2-8℃
试剂R4液体×1 瓶2-8℃
试剂R5粉剂×1 瓶常温保存


实验步骤: 

一、样本处理(具体比例可以参考文献) 

称取0.1g 样本,常温研碎,加入0.5mL 提取液,适当研磨后快速转移到离心管中,置于80℃水浴锅中10min, 振荡3~5 次,冷却后,4000g,25℃离心10min,取上清,加入2mg试剂R5,80℃脱色30min,再加入0.5mL 提取 液,4000g,25℃离心10min,取上清液测定。

二、试剂准备

溶液的配制: 试剂一:临用前加1mL蒸馏水溶解,用水稀释10倍,备用,即1mg/mL。 

三、测定步骤 

1、 可见分光光度计/酶标仪预热30min 以上,调节波长至480nm,蒸馏水调零。 

2、 样本测定

在1.5mL EP管中依次加入下列试剂:

试剂(μL)空白管标准管测定管
样本

25
试剂R1
25
蒸馏水25


试剂R2151515
                                                混匀,沸水浴煮沸5min 左右(盖紧,防止水分散失)
试剂R3175175175
试剂R450
5050

混匀,沸水浴 10min 左右,冷却后取 200μL 至微量玻璃比色皿或 96 孔板中测定 480nm 处的吸光值,空白管、 标准管和测定管分别记为 A空白、A标准和 A测定。

四、蔗糖含量计算 

1、 按照样本蛋白浓度计算 

蔗糖含量 (mg/mg prot) = (C 标准管×V1)×(A测定-A空白)÷(A标准-A空白) ÷(V1×Cpr)

此法需要自行测定蛋白浓度。 

2、按照样本质量计算 

蔗糖含量 (mg/g 质量) = (C 标准管×V1)×(A测定-A空白)÷(A2-A空白)÷(W×V1÷V2) 

C 标准管:标准管浓度;

V1:加入样本体积,0.1mL;

V2:加入提取液体积,2mL;

Cpr:样本蛋 白质浓度,mg/mL;

W:样本质量,g。


注意事项: 

1. 当样本吸光值大于 1.1 时,建议将样本用提取液稀释后进行测定。

2. 实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。 


本试剂盒仅供科研使用!

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