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/ Products Classification 点击展开+Cat. Number | HK21614-48S |
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Chemical Name | HK21614-48S 植物原花青素测试盒(酶标板法) |
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Qty 1 |
100T/48S |
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References | 原花色素(Oligomeric Proantho Cyanidins,OPC)是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物,广泛存在于植物的各种器官中,具有极强的抗氧化性和清除自由基的作用,广泛的应用于医药,食品,化妆品,保健品行业。 检测原理: 在酸性条件下,植物原花青素A环上的间苯二酚和间苯三酚与香草醛发生缩合反应,产生有色化合物,在500nm 处有特征吸收峰,测定500nm光吸收值,可计算植物中原花青素的含量。 需要的仪器,耗材: 1、可见分光光度计/酶标仪 2、微量玻璃比色皿/96孔板 3、天平 4、台式离心机 5、粉碎仪 6、超声清洗仪 7、30-50目筛 8、蒸馏水。 产品组成:
实验步骤: 注意:实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献) 将样本烘干至恒重,粉碎,过30-50 目筛之后,称取约0.1g,加入1mL 提取液,用超声提取法进行提取(功率300W,温度25℃,时间30min);12000rpm,25℃离心10min,取上清,用提取液定容至1mL,待测。 二、试剂准备 1.试剂R2:临用前加8 mL 提取液,充分溶解。配制好的试剂R2应尽快使用,2-8℃保存时间不超过一个月; 2.标准品:10 mg 原花青素。临用前加入1mL 提取液,充分溶解得到10 mg/mL 标准液,4℃保存两周; 3.工作液:临用前按照用量将试剂R1和试剂R2按照1:1 混合,现用现配。用多少配多少。 三、测定步骤 1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至500nm,分光光度计用蒸馏水调零。 2. 标准溶液制备:将10mg/mL标准液用提取液稀释为4、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625mg/mL的标准溶液。 标准液稀释可参考下表:
备注:实验中每个标准管需40μL 标准溶液。 3. 样本测定 1.5mL离心管中或96孔板依次入下列试剂:
四、OPC 计算公式 1. 根据标准管的浓度(x,mg/mL)和吸光度ΔA标准(y,ΔA标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA测定(y,ΔA测定)带入公式计算样本浓度(x,mg/mL)。 2. OPC的计算: (1)按样本质量计算:OPC含量(mg/g 质量)=x×V提取÷W (2)按样本蛋白浓度计算:OPC含量(mg/mg prot)=x×V提取÷(Cpr×V提取) V提取:加入提取液体积; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样本质量,g。 注意事项: 1、如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定,注意同步修改计算公式。 本试剂盒仅供科研使用! |
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