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| Cat. Number | HK21608-96S |
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| Chemical Name | HK21608-96S 植物叶绿素(chlorophyll)含量测试盒(酶标板法) |
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| Qty 1 |
100T/96S |
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| References | 植物叶绿素广泛存在于绿色植物组织中，是光合作用的细胞器。其含量与光合作用、营养状况密切相关，是反应植物生长状况的重要指标。 测定原理： 叶绿素a和叶绿素b在645nm和663nm处有最大吸收，根据经验公式可计算得叶绿素a和叶绿素b以及总叶绿素的含量。 需要的仪器，耗材: 1、可见分光光度计/酶标仪 2、微量玻璃比色皿/96孔板（建议使用非聚苯乙烯材质的96孔板） 3、可调式移液枪 4、天平 5、研钵/匀浆器 6、锡箔纸 7、蒸馏水 8、10mL试管 9、无水乙醇和丙酮。 产品组成：
实验步骤： 注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 1. 取新鲜植物叶片或其它绿色组织，用蒸馏水洗干净，然后吸干表面水分，去掉中脉，称取约0.1g，剪碎放入研钵或匀浆器中。 2. 加入1mL 蒸馏水，少量试剂R1（约10mg），在黑暗或弱光条件下充分研磨，转入10mL 试管中。 3. 用提取液冲洗研钵，将所有冲洗液转入10mL 试管中，用提取液定容至10mL，置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提3h，观察底部组织残渣颜色接近于白色则提取完全，若组织残渣未完全变白，继续浸提至组织残渣颜色接近于白色。 二、试剂准备 1、提取液：自备无水乙醇和丙酮，将无水乙醇：丙酮（V：V）=1:2 混合待用，提供一个125mL 空瓶。 三、测定步骤 1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至645nm和663nm，分光光度计用提取液调零。 2、取上层浸提液200μL于微量玻璃比色皿/96孔板中（若使用聚苯乙烯材质的96孔板，请在5min内尽快测定完成），测定663nm和645nm处吸光值，分别记为A663和A645。 四、叶绿素的计算 叶绿素a含量（mg/g 质量）=（21.2×A663-4.48×A645）×V提×F÷W÷1000 叶绿素b含量（mg/g 质量）=（38.2×A645-7.8×A663）×V提×F÷W÷1000 叶绿素总含量（mg/g 质量）=（33.7×A645+13.4×A663）×V提×F÷W÷1000 V提：提取液体积； F：稀释倍数； W：样本质量，g。 注意事项： 1、叶绿素对光敏感，研磨和提取等操作尽量避光或者在弱光下进行。 2、一定要浸提至组织残渣完全变白，否则提取不充分。 3、用提取液冲洗研钵一定要冲洗至所有的绿色物质被转移至EP管。 4、测定时吸光值超过1，可进行适当稀释；当吸光值小于0.05时，可以适当减少V提取的用量，注意计算公式中改变V提取数值。 5、若使用聚苯乙烯材质的96孔板进行测定，请在5min内尽快测定完成。 本试剂盒仅供科研使用! |
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