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Cat. Number
HK21607-96S
Chemical Name
HK21607-96S 植物叶绿素(chlorophyll)含量测试盒(可见分光光度法)
Qty 1
50T/48S
References

植物叶绿素广泛存在于绿色植物组织中,是光合作用的细胞器。其含量与光合作用、营养状况密切相关,是反应植物生长状况的重要指标。


测定原理:

叶绿素a和叶绿素b在645nm和663nm处有最大吸收,根据经验公式可计算得叶绿素a和叶绿素b以及总叶绿素的含量。


需要的仪器,耗材:

1、可见分光光度计

2、玻璃比色皿

3、可调式移液枪

4、天平

5、研钵/匀浆器

6、锡箔纸

7、蒸馏水

8、10mL试管

9、无水乙醇和丙酮。


产品组成:

试剂名称规格保存条件
提取液1液体×1 瓶(自备)2-8℃
试剂R1粉剂×1 瓶2-8℃


实验步骤:

注意:实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

1. 取新鲜植物叶片或其它绿色组织,用蒸馏水洗干净,然后吸干表面水分,去掉中脉,称取约0.1g,剪碎放入研钵或匀浆器中。

2. 加入1mL 蒸馏水,少量试剂R1(约10mg),在黑暗或弱光条件下充分研磨,转入10mL 试管中。

3. 用提取液冲洗研钵,将所有冲洗液转入10mL 试管中,用提取液定容至10mL,置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提3h,观察底部组织残渣颜色接近于白色则提取完全,若组织残渣未完全变白,继续浸提至组织残渣颜色接近于白色。

二、试剂准备

1、提取液:自备无水乙醇和丙酮,将无水乙醇:丙酮(V:V)=1:2 混合待用,提供一个125mL 空瓶。

三、测定步骤

1、分光光度计预热30min以上,调节波长至645nm和663nm,提取液调零。

2、取上层浸提液1mL于1mL玻璃比色皿,测定663nm和645nm处吸光值,分别记为A663和A645。

四、叶绿素的计算

叶绿素a含量(mg/g 质量)=(21.2×A663-4.48×A645)×V提×F÷W÷1000 

叶绿素b含量(mg/g 质量)=(38.2×A645-7.8×A663)×V提×F÷W÷1000 

叶绿素总含量(mg/g 质量)=(33.7×A645+13.4×A663)×V提×F÷W÷1000

V提:提取液体积;

F:稀释倍数;

W:样本质量,g。


注意事项:

1、叶绿素对光敏感,研磨和提取等操作尽量避光或者在弱光下进行。

2、一定要浸提至组织残渣完全变白,否则提取不充分。

3、用提取液冲洗研钵一定要冲洗至所有的绿色物质被转移至EP管。

4、测定时吸光值超过1,可进行适当稀释;当吸光值小于0.05时,可以适当减少V提取的用量,注意计算公式中改变V提取数值。

5、若使用聚苯乙烯材质的96孔板进行测定,请在5min内尽快测定完成。


本试剂盒仅供科研使用!

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