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Cat. Number

HK21604-48S

Chemical Name

HK21604-48S 植物硝态氮测试盒(酶标板法)

Qty 1

100T/48S

References

硝酸盐是植物吸收的主要含氮物质之一。硝酸盐在植物体内的还原部位不同，可以在根内，也可以在枝叶内进行，且因植物类别和环境条件而异。因此，测定植物体内硝态氮含量变化对了解氮代谢机制有重要的意义。

检测原理：

在浓酸条件下，NO3-可以与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，后者在PH>12的条件下呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可比色测定计算得硝态氮含量。

需自备的仪器和用品：

1、可见分光光度计/酶标仪

2、台式离心机

3、水浴锅

4、微量玻璃比色皿/96孔板

5、可调式移液枪

6、研钵/匀浆器

7、浓硫酸

8、冰和蒸馏水。

产品组成：

实验步骤：

注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理（具体比例可以参考文献）

按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 样本，加入1mL 蒸馏水）加入蒸馏水，室温匀浆后置于90℃恒温水浴锅中浸提30min，期间不断晃动或者置于90℃恒温摇床中振荡提取30min，待冷却后于25℃，12000g 离心15min，取上清待测。

二、试剂准备

1、试剂R1：临用前根据用量每支加入0.5 mL 浓硫酸充分溶解。配制好后尽快使用，4℃可保存一周。

2、标准品：10 mg 硝酸钾，临用前加入0.935 mL 蒸馏水溶解，配成1400 μg/mL 的NO3-N 标准液。

三、测定步骤

1. 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至410nm，分光光度计蒸馏水调零。

2. 将1400μg/mL NO3-N标准液用蒸馏水50倍稀释成28μg/mL的标准溶液。

3. 操作表

试剂(uL)	测定管	对照管	标准管	空白管
样本	8	8	-	-
标准溶液	-	-	8	-
蒸馏水	-	12	-	8
试剂R1	12	-	12	12
充分混匀，25℃静置30min
试剂R2	280	280	280	280
混匀，涡旋振荡，使出现的沉淀充分溶解，取200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板中测定410nm 处吸光值A，计算ΔA=A 测定管-A 对照管，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。