服务热线
021-60498804
产品中心
/ Products Classification 点击展开+Cat. Number | HK21600-48S |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Chemical Name | HK21600-48S 植物类黄酮测试盒(酶标板法) |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Qty 1 |
100T/48S |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
References | 类黄酮是一类多苯化合物,属于植物次生代谢物,对人体具有消炎,抗菌,降血脂,清除体内羟自由基,预防癌症等作用。 检测原理: 在碱性亚硝酸盐溶液中,类黄酮与铝离子形成在470nm处有特征吸收峰的红色络合物,测定样本提取液在470nm处的吸光值,即可计算样本类黄酮含量。 需自备的仪器和用品: 1、可见分光光度计/酶标仪 2、微量玻璃比色皿/96孔板 3、天平 4、烘箱 5、粉碎仪 6、30-50目筛 7、超声清洗仪 8、60%乙醇 9、台式离心机 10、研钵 11、蒸馏水 12、水浴锅/恒温培养箱。 产品组成:
实验步骤: 注意:实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理(具体比例可以参考文献) 将样本烘干至恒重,粉碎,过30-50 目筛之后,称取约0.1g,加入1mL 提取液,用超声提取法进行提取,超声功率300W,温度60℃,提取30min。12000rpm,25℃,离心10min,取上清,用提取液定容至1mL,待测。 二、试剂准备 1、提取液:自备60%乙醇,常温保存; 2、标准品:10 mg 芦丁。临用前加入1 mL 标准品稀释液配制成10 mg/mL 标准液备用,2-8℃保存四周。 三、测定步骤 1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至470nm,分光光度计用蒸馏水调零。 2. 标准溶液的制备:将10mg/mL芦丁标准溶液用标准品稀释液稀释至2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078、0.039mg/mL备用,具体稀释可参考下表。
3. 操作表
三、类黄酮含量计算 1. 根据标准管的浓度(x,mg/mL)和吸光度ΔA标准(y,ΔA标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA测定(y,ΔA测定)带入公式计算样本浓度(x,mg/mL)。 2. 按样本质量计算 类黄酮含量(mg/g 质量)=x×V提取÷W=x÷W。 3. 按样本蛋白浓度计算 类黄酮含量(mg/mg prot)=x×V提取÷(Cpr×V提取) V提取:加入提取液体积; W:样本质量,g; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL。 注意事项: 1. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。注意同步修改计算公式。 2. 显色完成后立即测定,2小时后吸光值会下降。 本试剂盒仅供科研使用! |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||