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Cat. Number

HK21599-24S

Chemical Name

HK21599-24S 植物类黄酮测试盒(可见分光光度法)

Qty 1

50T/24S

References

类黄酮是一类多苯化合物，属于植物次生代谢物，对人体具有消炎，抗菌，降血脂，清除体内羟自由基，预防癌症等作用。

检测原理：

在碱性亚硝酸盐溶液中，类黄酮与铝离子形成在470nm处有特征吸收峰的红色络合物，测定样本提取液在470nm处的吸光值，即可计算样本类黄酮含量。

需自备的仪器和用品：

1、可见分光光度计

2、1mL玻璃比色皿

3、天平

4、烘箱

5、粉碎仪

6、30-50目筛

7、超声清洗仪

8、60%乙醇

9、台式离心机

10、研钵

11、蒸馏水

12、水浴锅/恒温培养箱。

产品组成：

实验步骤：

注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理（具体比例可以参考文献）

将样本烘干至恒重，粉碎，过30-50 目筛之后，称取约0.1g，加入1mL 提取液，用超声提取法进行提取，超声功率300W，温度60℃，提取30min。12000rpm，25℃，离心10min，取上清，用提取液定容至1mL，待测。

二、试剂准备

1、提取液：自备60%乙醇，常温保存；

2、标准品：10 mg 芦丁。临用前加入1 mL 标准品稀释液配制成10 mg/mL 标准液备用，2-8℃保存四周。

三、测定步骤

1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至470nm，蒸馏水调零。

2. 标准溶液的制备：将10mg/mL芦丁标准溶液用标准品稀释液稀释至1.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078、0.039、0.02mg/mL备用，具体稀释可参考下表。

3. 操作表

试剂名称（uL）	对照管	测定管	标准管	空白管
样本待测液	200	200	-	-
标准溶液	-	-	200	-
蒸馏水	-	-	-	200
试剂R1	50	50	50	50
涡旋混匀，室温静置5min
试剂R2	-	50	50	50
涡旋混匀，室温静置5min
试剂R3	400	400	400	400
60%乙醇（μL）	350	300	300	300
涡旋混匀，置于37℃水浴锅/恒温培养箱中准确反应45 min，10000g，室温离心10min，取上清于1mL 玻璃比色皿中，测定A470，计算ΔA 测定=A 测定-A 对照，ΔA 标准=A 标准-A 空白。每个测定管需设一个对照管，标准曲线和空白管只需测1-2 次。