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| Cat. Number | HK21598-96S |
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| Chemical Name | HK21598-96S 植物可溶性糖含量测试盒(酶标板法) |
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| Qty 1 |
100T/96S |
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| References | 糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一，也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖是指样本中的还原单糖及在本法测定条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解为葡萄糖的淀粉。 测定原理： 检测原理为蒽酮比色法。强酸可使糖类脱水生成糠醛，生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色，该物质在 620 nm 处有最大吸收。可用于可溶性单糖、寡糖和多糖的含量测定，具有灵敏度高、简便快捷、适用于微量样本的测定等优点。 需要的仪器，耗材: 1、可见分光光度计/酶标仪 2、台式离心机 3、可调式移液器 4、微量石英比色皿/96孔板 5、研钵、冰和蒸馏水。 产品组成：
实验步骤： 一、样本处理(具体比例可以参考文献) 称取约0.1-0.2g样本，加入1mL蒸馏水研磨成匀浆，倒入有盖离心管中，沸水浴 10min(盖紧，以防止水分散失)，冷却后，8000g，常温离心 10min，取上清液于 10mL试管管中，用蒸馏水定容至 10mL，摇匀备用。 二、试剂准备 1、标准品：10mg无水葡萄糖(干燥失重<0.2%)，临用前加入1mL 蒸馏水溶解，配制成10mg/mL 葡菊糖溶液备用，2-8℃保存2周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。 2、工作液的配制：在一支试剂R1中加入1.5mL试剂R2，充分溶解后使用，如难溶解，可振荡溶解。 备注：用不完的试剂可2-8℃保存一周。 三、测定步骤 1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至620nm，分分光光度计蒸馏水调零。 2、调节水浴锅至95℃。 3、标准品准备：将标准品用蒸馏水按梯度稀释。 4、标准溶液稀释表:
备注：实验中每个标准管需40uL标准溶液。 4、加样表(在EP 管中反应):
混匀，置95℃水浴中10min(盖紧，以防止水分散失)，冷却至室温后，取200uL转移至微量比色皿或96孔板中，于620nm处测定吸光值，分别记为A空白管、A测定管、A标准管，并计算△A=A测定管-A空白管、△A标准=A标准管-A空白管。(空白管和标曲只要做1-2管) 四、可溶性糖含量计算 1、标准曲线的建立 根据标准管的浓度(y，mg/mL)和吸光度△A标准(x，△A标准)，建立标准曲线。根据标准曲线，将△A(x，△A)带入公式计算样本浓度(y，mg/mL)。 2、按样本质量计算 可溶性糖(mg/g质量)=(yxV1)÷(WxV1-V2) 3、按样本蛋白浓度计算 可溶性糖(mg/mgprot)=(yxV1)÷(V1xCpr) V1：加入样本体积; V2：样本总体积; Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL; W：样本质量，g 注意事项: 1.如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。 2.由于浓硫酸具有强腐蚀性，请谨慎操作。 本试剂盒仅供科研使用! |
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