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| Cat. Number | HK21595-48S |
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| Chemical Name | HK21595-48S 植物花色苷测试盒(可见分光光度法) |
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| Qty 1 |
50T/48S |
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| References | 花色苷是一类可食用的易溶于水等溶剂的天然色素。花色苷使植物呈现多彩的颜色，本身更具有多种保健作用，因而在天然食用色素、保健品和医药行业都有着广阔的应用前景。 检测原理： 根据花色苷在不同pH下的结构性质测定花色苷含量，在pH为1时花色苷在530nm处有最大吸收峰,而当pH为4.5时，花色苷转变为无色查尔酮形式在530nm处无吸收峰，通过测定不同pH下的530nm和700nm处的吸光度值计算样本中花色苷的含量。 需自备的仪器和用品： 1、可见分光光度计 2、离心机 3、水浴锅 4、可调式移液器 5、微量玻璃比色皿/96孔板 6、研钵/匀浆器 7、蒸馏水。 产品组成：
实验步骤： 注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 按照样本质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 样本，加入1mL 提取液），充分匀浆后转移到EP 管中，提取液定容至1mL，盖紧后60℃浸提30min，期间可震荡数次。12000rpm，常温离心10min，取上清液待测。 二、测定步骤 1. 可见分光光度计预热30min以上，蒸馏水调零。 2. 加样表：
充分混匀后测定测定管1 和测定管2 分别在530nm 和700nm 处的吸光度，测定管1 在530nm 和700nm 处的吸光值记为A1、A1’，测定管2 在530nm 和700nm 处的吸光值记为A2、A2’，计算ΔA=（A1-A1’）-（A2-A2’）。 三、花色苷含量计算 A、以微量玻璃比色皿计算： 1．按样本质量计算： 花色苷含量（μmol/g 质量）=[ΔA÷(ε×d)×103×F]×V提取÷W=0.037×ΔA× F÷W 2．按样本蛋白浓度计算 花色苷含量（μmol/mg prot）=[ΔA÷(ε×d)×103×F]×V提取÷(Cpr ×V提取)=0.037×ΔA×F÷Cpr F：稀释倍数，该反应体系下为10； d：比色皿光径，1cm； W：样本质量，g； ε：花色苷的摩尔消光系数，2.69×104mL/mmol/cm； V提取：提取液总体积，1mL； 103：单位换算系数，1mmol=103μmol； Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL（蛋白浓度需用PBS单独提取后自行测定）。 注意事项： 1. 如果A1大于1，可以适当加大稀释倍数，保证总体积1mL不变，如10μL上清液和180μL试剂R1（相当于稀释20倍）；如果A1小于0.1，可以适当缩小稀释倍数，保证总体积不变，如100μL上清液和100μL试剂R1（相当于稀释2倍），使A1保持在0.1~1范围内，可提高检测灵敏度；注意应同样调整上清液和试剂R2体积比例；计算时以实际稀释倍数代入计算公式中。 2. 因提取液会使蛋白变性，若使用蛋白浓度计算需用PBS单独提取后自行测定。 本试剂盒仅供科研使用! |
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