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| Cat. Number | HK21593-48S |
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| Chemical Name | HK21593-48S 植物氨态氮测试盒(可见分光光度法) |
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| Qty 1 |
50T/48S |
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| References | 氮素是构成生物体的一种必需元素，自然界中的氮素循环包括许多转化作用。空气中的氮气被固氮微生物及植物与微生物的共生体固定成氨态氮，经过硝化微生物的作用转化成硝态氮，后者被植物或微生物同化成有机氮化物，植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。 测定原理： 氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应，产生蓝紫色化合物，在570nm有特征吸收峰；通过测定570nm吸光度，来计算氨基酸含量。 需自备的仪器和用品： 1、可见分光光度计 2、台式离心机 3、水浴锅 4、1mL玻璃比色皿 5、可调式移液枪 6、研钵/匀浆器 7、无水乙醇、冰和蒸馏水。 产品组成：
实验步骤： 注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理（具体比例可以参考文献） 按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g，加入1mL 提取液）加入提取液，室温匀浆后于25℃，12000g 离心10min，取上清待测。 二、试剂准备 1、试剂R1：临用前将试剂R3倒入使其充分溶解备用。该试剂溶解后10 天内有效。 2、试剂R2：临用前加2 mL 蒸馏水充分溶解。 3、标准品：10 mg 半胱氨酸，临用前加入1.157 mL 提取液，得到1000 μg/mL 氮标准液。 三、测定步骤 1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至570nm，蒸馏水调零。 2. 将1000μg/mL氮标准液用提取液分别稀释为300、200、100、50、25 μg/mL。 3. 操作表：
充分混匀后盖紧瓶盖封口膜封口（防止水分散失），置于沸水浴中保温10min，冷却后反复颠倒EP 管数次，将测定管8000rpm 离心5min 后取上清，于570nm 测定吸光值。显色后务必在30min 内测完。计算ΔA=A 测定管-A 空白管，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。 四、植物氨态氮含量计算 1. 标准曲线的绘制： 以各个氮标准液为横坐标，其对应的ΔA标准为纵坐标，建立标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA带入方程中，得到x (μg/mL)。 2. NH3-N含量的计算： （1）按样本质量计算：NH3-N含量（μg/g 质量）=x×V提取÷W （2）按蛋白浓度计算：NH3-N含量（μg/mg prot）=x×V提取÷（Cpr×V提取） W：样本质量，g； Cpr：蛋白浓度，mg/mL； V提取：样本提取液总体积。 注意事项： 为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。 本试剂盒仅供科研使用! |
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下一个：植物氨态氮测试盒(酶标板法)上一个：植酸酶测试盒(酶标板法) |
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