HK21589-9S 脂肪酸合成酶(FAS)测试盒(紫外分光光度法)_上海惠诚生物生物试剂,标准品,仪器设备,耗材,一站式服务

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Cat. Number

HK21589-9S

Chemical Name

HK21589-9S 脂肪酸合成酶(FAS)测试盒(紫外分光光度法)

Qty 1

10T/9S

References

脂肪酸合成酶（Fatty acid synthetase，FAS）是一种关于脂肪酸再生能力并起重要作用的限速酶。

测定原理：
脂肪酸合成酶通过催化丙二酰辅酶Ａ、乙酰辅酶A和NADPH 生成长链脂肪酸和NADP+，NADPH 在340nm 条件下有特征吸收峰。通过检测340nm 条件下吸光值的下降速率，可以计算出FAS 活性。

需要的仪器，耗材:

1、紫外分光光度计

2、水浴锅/培养箱

3、超声波细胞破碎仪

4、低温离心机

5、可调式移液器

6、1mL石英比色皿

7、研钵/匀浆器

8、冰和蒸馏水。

产品组成：

实验步骤：

注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理（具体比例可以参考文献）

1、细菌、细胞样本的制备：按照细胞数量（104 个）: 提取液体积（mL）为500~1000 : 1 的比例（建议500万细胞加入1 mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300W，超声3 秒，间隔9 秒，总时间5 min）；于4℃，12000g 离心20 min，取上清液，置于冰上待测。

2、组织样本的制备：按照质量（g）: 提取液体积(mL)为1: 5~10 的比例（建议称取约0.1 g 组织，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，12000 g 离心20 min，取上清液，置于冰上待测。

3、血清（浆）等液体样本：直接测定

二、试剂准备

1、试剂R1：临用前取一支加入1.25 mL 试剂R3，充分溶解，用不完的试剂分装后-20℃保存，可以保存2 周，禁止反复冻融。

2、试剂R2：临用前取一支加入1.25mL 试剂R3，充分溶解，用不完的试剂分装后-20℃保存，可以保存2 周，禁止反复冻融。

3、试剂R4：临用前取一支加入0.5mL 试剂R3，充分溶解，用不完的试剂分装后-20℃保存，可以保存2 周，禁止反复冻融。

三、测定步骤

1、紫外分光光度计预热30 min 以上，调节波长至340 nm，蒸馏水调零。

2、试剂R3临用前置于37℃（哺乳动物）或者25℃（其他物种）保温15min。

3、加样表（在比色皿中加入下列试剂）

试剂名称	测定管	空白管
上清液	100	-
蒸馏水	-	100
试剂R1	80	80
试剂R2	80	80
试剂R3	700	700
试剂R4	40	40
迅速吹打混匀，记录第15s 的吸光值A1 测定（A1 空白），和1min15s 时的吸光值A2 测定（A2 空白），计算ΔA =（A1 测定-A2 测定）-（A1 空白-A2 空白）。