HK21586-48S 脂蛋白酯酶(LPL)测试盒(酶标板法)_上海惠诚生物生物试剂,标准品,仪器设备,耗材,一站式服务

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Cat. Number

HK21586-48S

Chemical Name

HK21586-48S 脂蛋白酯酶(LPL)测试盒(酶标板法)

Qty 1

100T/48S

References

脂蛋白酯酶（Lipoproteinlipase，LPL）是甘油三酯降解的降速酶，可催化甘油三酯水解为脂肪酸和单酸甘油酯，主要在肝脏实质细胞中合成，在脂质代谢和转运中发挥重要作用。

检测原理：

脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕榈酸酯产生4-硝基苯酚，在400nm有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、低温台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管、冰、丙酮和蒸馏水。

产品组成：

试剂名称	规格	保存条件
试剂R1	液体×1瓶	2-8℃
试剂R2	粉剂×1支	2-8℃
试剂R3	液体×1瓶	2-8℃
标准品	液体×1瓶	2-8℃

实验步骤：

注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：试剂R1体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500 万细菌或细胞加入1mL 试剂R1），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30 次）；10000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、组织：按照组织质量（g）：试剂R1体积（mL）为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 试剂R1），进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3、血清（浆）样本：直接检测。

二、试剂准备

1、试剂R2：临用前加入1 mL 丙酮溶解备用；

2、标准品：5 μmol/mL 对硝基苯酚标准溶液。

三、测定步骤

1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。

2、将5μmol/mL标准液用试剂R1稀释16倍至0.3125μmol/mL的标准溶液备用。

3、操作表：在1.5mL EP管中进行下列操作：

试剂名称(uL)	对照管	测定管	标准管	空白管
样本	30	30	-	-
标准管	-	-	30	-
蒸馏水	-	-	-	30
试剂R1	120	108	120	120
试剂R2	-	12	-	-
混匀，45℃水浴10min
试剂R3	150	150	150	150
充分混匀放置2min 后，对照管和测定管8000g 常温离心10min，取200μL 对照管和测定管的上清、标准管和空白管于微量玻璃比色皿/96 孔板中测定400nm 处吸光值，记为A 对照管、A 测定管、A 空白管、A 标准管，ΔA=A 测定管- A 对照管，ΔA 标准=A 标准管- A 空白管。