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| Cat. Number | HK21575-24S |
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| Chemical Name | HK21575-24S 蔗糖合成酶(SS)测试盒(可见分光光度法) |
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| Qty 1 |
50T/24S |
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| References | 蔗糖是源(叶片等)光合产物向“库”器官运输的主要形态。蔗糖合成酶SS(EC 2.4.1.13)催化植物体内游离果糖和葡萄糖合成蔗糖。 需自备的仪器和用品： 可见分光光度计、水浴锅、离心机、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰。 产品组成：
实验步骤： 注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。 一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献) 按照组织质量(g)：提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液)，进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 二、试剂准备 试剂R2：临用前加1 mL水，配制成10 mg/mL蔗糖溶液，再将其用蒸馏水稀释为500μg/mL备用。 三、测定步骤 1、分光光度计预热30min 以上，调节波长至480nm，蒸馏水调零。 2、样本测定 在1.5mL EP管中依次加入下列试剂:
混匀，80℃水浴保温20min，冷却后，12000rpm常温离心10min。吸取上清液于1mL玻璃比色皿中，在480nm下测定各管吸光值（标准管和空白管只做1-2管，每个测定管需要设定一个对照管）。计算ΔA测=A测定管-A对照管，ΔA标=A标准管-A空白管。 四、SS活力单位的计算 1. 按照蛋白浓度计算 单位定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。 SS活性(U/mg prot)=（C标准管×V1×ΔA测÷ΔA标）÷(V1×Cpr)÷T 2. 按照样本质量计算 单位定义：每 g 组织每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。 SS活性(U/g 质量)=（C标准管×V1×ΔA测÷ΔA标）÷(W×V1÷V2)÷T C标准管：标准管浓度； V1：加入反应体系中样本体积； V2：加入提取液体积； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL； W：样本鲜重，g； T：反应时间，10min。 注意事项： 尽量在30min内完成测定。 本试剂盒仅供科研使用! |
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