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| Cat. Number | HK21573-24S |
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| Chemical Name | HK21573-24S 原果胶含量测试盒(可见分光光度法) |
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| Qty 1 |
50T/24S |
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| References | 果胶是植物细胞壁主要组成成分之一，分为水溶性果胶和不溶性果胶，即原果胶。因其具有良好的乳化、增稠和凝胶作用，在食品、纺织、印染、烟草、冶金等领域具有较广泛的应用。 测定原理： 原果胶在稀酸中水解为可溶性果胶，并进一步转化为半乳糖醛酸，产物在强酸中与咔唑缩合生成紫红色化合物，在530 nm处有特征吸收峰。 需自备的仪器和用品： 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、丙酮、浓硫酸、无水乙醇和蒸馏水。 产品组成：
实验步骤： 注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 取约0.1g 样本，加入1mL 提取液一，室温快速匀浆，95℃水浴20min，冷却至室温，4000g 25℃离心10min，弃上清。沉淀加入1.5mL 提取液1和丙酮交替各洗2 遍（涡旋振荡2min 左右，4000g 25℃离心10min，弃上清即可），沉淀即为粗细胞壁，加入1mL 提取液2（去除淀粉）浸泡15 小时，4000g 25℃离心10min，弃上清，加入1mL提取液3，充分匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清液待测。 二、试剂准备 1、提取液1：80%乙醇，自备。即将80 mL 无水乙醇和20 mL 蒸馏水混合。 2、试剂R1：浓硫酸60 mL，自备。 3、标准品：10 mg 半乳糖醛酸，临用前加入0.943 mL 提取液3，配成50μmol/mL 的标准液。 三、测定步骤 1、分光光度计预热30min以上，调节波长至530nm，蒸馏水调零。 2、将50μmol/mL标准液用提取液3稀释为0.7、0.6、0.5、0.4、0.2、0.1、0.05、0.025μmol/mL的标准溶液备用。 3、操作表：
四、原果胶含量的计算 1、标准曲线的绘制： 以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA测定带入方程得到x（μmol/mL）。 2、原果胶含量的计算： 原果胶含量(μmol/g 质量)= x×V提取液3÷W V提取液3：加入提取液3的体积； W：样本质量，g。 注意事项： 1、浓硫酸具有强腐蚀性，操作时需特别注意，90℃加热取出后冷却再打开盖子，以防液体飞溅烧伤。 2、若ΔA 超过0.3，可将样本用提取液3进行适当稀释再进行测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。 本试剂盒仅供科研使用! |
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