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| Cat. Number | HK21555-96S |
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| Chemical Name | HK21555-96S 组织总磷含量测试盒(酶标板法) |
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| Qty 1 |
100T/96S |
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| References | 磷的存在形态包括无机磷与有机磷。无机磷主要指磷酸根，参与生物体内多种代谢，包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等。通过测定总磷与无机磷含量即可了解作物对磷的利用率，进而为合理施肥提供依据。 测定原理： 总磷经消化后，转化成无机磷。钼蓝法是测定无机磷含量的经典方法，使磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵。此化合物经对苯二酚、亚硫酸钠还原成兰色化合物--钼蓝，通过测定660nm光吸收，即可计算磷含量，进而可计算出组织中总磷含量。 需自备的试剂和器材： 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液枪、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水和浓硫酸（99%)。 产品组成：
实验步骤： 一、有机磷消化（具体比例可以参考文献） 称取约 0.1 g 组织于带盖试管中，加浓硫酸 1.0 mL，盖紧（封口膜封口，防止水分散失）后沸水浴 10min 左右， 待溶液呈黑色或棕色时取出。稍冷后，加试剂R1 200μL，充分混匀，盖紧后继续沸水浴，直到溶液呈透明状，取 出室温冷却后，加蒸馏水 3.8 mL，充分混匀；室温，10000rpm，离心 10min，取上清液，待测。 二试剂准备 1、试剂R1：强腐蚀性，强氧化性;易挥发，不使用时请及时盖紧盖子; 2、试剂R3A：临用前加入5mL蒸馏水溶解，用不完的试剂2-8℃保存4周; 3、试剂R3B：临用前加入5mL蒸馏水溶解，用不完的试剂2-8℃保存4周; 4、试剂R3：临用前按试剂R3A:试剂R3B:试剂R2=1:1:1的体积比例配制，配好的试剂R3应为浅黄色。若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，试剂三根据样本量现用现配，限当天使用。 5、标准品: 1mmolL无机磷标准液。 三、测定步骤 1、分光光度计或酶标仪预热 30 min 以上，调节波长到 660 nm，蒸馏水调零。 2、打开水浴锅，调节温度到 40℃。 3、样本测定
混匀后置于 40℃水浴保温 10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度，分别记为 A 空白管、A 标准管、A 测定管。 （空白管和标准管只需测 1-2 次）。 四、组织总磷含量计算 总磷含量(mmol/g 质量)= [C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×V 总÷W C 标准液：标准溶液浓度； V 总：上清液总体积； W：样本质量，g。 注意事项： 1、如果样本测定吸光值大于1.5，需用蒸馏水做相应稀释后进行测定。如果样本测定吸光值较低或接近空白值，建议增大样本量后重新进行测定。注意同步修改计算公式。 本试剂盒仅供科研使用! |
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