HK21551-48S 胰蛋白酶测试盒(紫外分光光度法)_上海惠诚生物生物试剂,标准品,仪器设备,耗材,一站式服务

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Cat. Number

HK21551-48S

Chemical Name

HK21551-48S 胰蛋白酶测试盒(紫外分光光度法)

Qty 1

50T/48S

References

胰蛋白酶选择性水解变性蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链，是一种重要的消化酶。此外，胰蛋白酶还广泛应用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等的辅助治疗。

测定原理：

胰蛋白酶催化水解BAEE 的酯键，生成BA，BA在253nm处有吸收峰，通过测定253nm吸光度增加速率，即可计算出胰蛋白酶的活性。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计、1mL石英比色皿、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

产品组成：

实验步骤：

注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

称取约0.1g 样本，加入1mL 提取液进行冰浴匀浆，10000 rpm 4℃离心10 分钟，取上清液，即粗酶液，置冰上待测。或者直接称取1mg 酶粉，加1mL 提取液，充分混匀后置冰上待测（为保证实验的准确性建议梯度稀释）。

二、试剂准备

1、试剂R1：临用前加入1mL 蒸馏水，充分溶解；

2、工作液的配制：将试剂R1、试剂R2按2：97 配制工作液，按需配制，实验前置于37℃水浴预热20min 以上。

三、测定步驟：

1、分光光度计预热30min 以上，调节波长至253nm，蒸馏水调零。

2、测定步骤：在1mL石英比色皿依次加入

试剂名称(uL)	空白管	测定管
工作液	990	990
蒸馏水	10	-
粗酶液	-	10
空白管：迅速于253nm 测定0s 和60s的吸光度，分别记为A1、A2，ΔA 空白=A2-A1。
测定管：迅速于253nm 测定0s 和60s的吸光度，分别记为A3、A4，ΔA 测定=A4-A3。