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| Cat. Number | HK21516-24S |
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| Chemical Name | HK21516-24S 胃蛋白酶测试盒(可见分光光度法) |
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| Qty 1 |
50T/24S |
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| References | 胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌，分解食物中蛋白质成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别，慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。 测定原理： 胃蛋白酶可催化血红蛋白水解，水解产物酪氨酸在275nm下有特征吸收峰。通过测定吸光值的变化来计算酶活。 需自备的仪器和用品： 紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1吗L石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。 产品组成：
实验步骤： 注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 称取约0.1g 组织加入1mL 提取液进行冰浴匀浆或者0.1mL 胃液加入0.9mL 提取液。10000rpm 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。 二、试剂准备 1、试剂R1：临用前加入25mL 试剂R2，充分溶解； 2、试剂R3：临用前加入25mL 蒸馏水，充分溶解。 三、测定步骤 1、分光光度计预热30min 以上，调节波长至275nm，蒸馏水调零。 2、操作表：
注意：对照管后加样本，而测定管先加样本 四、胃蛋白酶活性计算 1、按样本蛋白浓度计算 活性单位定义：37℃下每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。 胃蛋白酶酶活（U/mg prot）=（ΔA÷ε÷d×V 反总）÷（Cpr×V 样本）÷T 2、按样本质量计算 活性单位定义：37℃下每克组织每分钟催化血红蛋白水解生成1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。 胃蛋白酶酶活（U/g 质量）=（ΔA÷ε÷d×V 反总）÷（W×V 样本÷V 提）÷T 3、按液体体积计算 活性单位定义：37℃下每毫升液体每分钟催化血红蛋白水解生成1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。 胃蛋白酶酶活（U/mL）=（ΔA÷ε÷d×V 反总）÷（V 样本÷V 提×V 液）÷T Cpr：样本蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定； W：样本质量，g； V 反总：反应总体积； V 提：粗酶液总体积； T：催化反应时间，10min； V 样本：加入样本体积； V 液：液体体积； ε：酪氨酸吸光系数，1.4μmol-1·mL·cm-1； d：光程，1cm。 本试剂盒仅供科研使用! |
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下一个：胃蛋白酶测试盒(酶标板法)上一个：维生素E测试盒(酶标板法) |
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