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Cat. Number

HK21514-24S

Chemical Name

HK21514-24S 维生素E测试盒(可见分光光度法)

Qty 1

50T/24S

References

维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是生物体中最主要的抗氧化剂之一，能阻止不饱和脂肪酸收到过氧化作用的损伤，维持不饱和脂肪酸细胞膜的完整性和正常功能，具有延缓衰老、预防溶血性贫血作用，在医药、化妆品、保健品、食品行业具有较高的应用价值。

测定原理：

VE还原Fe3+为Fe2+，Fe2+与1,10-菲罗啉产生有色络合物，在510nm有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、漩涡震荡仪、无水乙醇、正庚烷、蒸馏水和EP管。

产品组成：

实验步骤：

注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1.组织样本

试剂名称（uL）
组织（g）	0.1
蒸馏水	200
试剂R1	300
试剂R2	500
匀浆后在漩涡混匀仪上震荡5min（充分抽提），于25℃，5000g 离心5min，取上层正庚烷抽提液300μL 加入到900μL 无水乙醇中（上层抽提液：无水乙醇=1:3）混匀待测。

注意：离心后，吸取上层正庚烷抽提液时，切勿将中间无水乙醇与水的液相层吸入。

2. 血清（血浆）样本

试剂名称（uL）
血清（血浆）	200
蒸馏水	200
试剂R1	300
试剂R2	500
匀浆后在漩涡混匀仪上震荡5min（充分抽提），于25℃，5000g 离心5min，取上层正庚烷抽提液300μL 加入到900μL 无水乙醇中（上层抽提液：无水乙醇=1:3）混匀待测。

注意：离心后，吸取上层正庚烷抽提液时，切勿将中间无水乙醇与水的液相层吸入。

二、试剂准备

1、试剂R1：自备无水乙醇，常温保存。

2、试剂R2：自备正庚烷，常温保存。

3、试剂R5贮备液的制备：将试剂R5的粉剂溶于2 mL 无水乙醇配制成贮备液，4℃避光保存待用。

4、试剂R5应用液的制备：取试剂R5贮备液用无水乙醇20 倍稀释后使用，建议当天配制当天使用。

5、标准品：临用前加入1 mL 试剂R3，配成20 mg/mL 的标准品溶液。

三、测定步骤

1．分光光度计预热30min以上，调节波长至510nm，无水乙醇调零。

2．标准溶液的制备：将20mg/mL标准液用试剂R3稀释为50、25、12.5、6.25、3.125 μg/mL的标准溶液备用。

3．操作表：依次加入下列试剂

试剂名称(uL)	对照管	测定管	标准管	空白管
待测样本	500	500	-	-
标准溶液	-	-	500	-
试剂R3	-	-	-	500
试剂R4	100	100	100	100
试剂R5	-	100	100	-
试剂R1	20	-	-	100
充分混匀，立即记时，25℃反应5 min
试剂R6	300	300	300	300
充分混匀，于1mL 玻璃比色皿，测定510 nm 处吸光值，记为A 对照管和A 测定管，A 标准管和A 空白管。计算ΔA=A测定管-A 对照管，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。每个测定管需设一个对照管。