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Cat. Number
HK21503-96S
Chemical Name
HK21503-96S 土壤总磷/有机磷/无机磷含量测试盒(酶标板法)
Qty 1
100管/96S
References

土壤总磷包括有机磷和无机磷,其中无机磷能够直接被植物利用。土壤有机磷经过矿化分解而转化为无机磷。同时测定土壤总磷、有机磷和无机磷,可以全面反映土壤磷营养状况。


测定原理:

利用钼蓝法定磷。钼蓝法是测定无机磷含量的经典方法,使磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵。此化合物经对苯二酚、亚硫酸钠还原成兰色化合物--钼蓝,通过测定660nm光吸收,即可计算出无机磷含量。取一份土样,通过浸提法测定土壤无机磷含量;另外取一份土样,经高温灼烧后,土壤有机磷转化为无机磷,测得土壤总磷含量;总磷含量减去无机磷含量,即可计算出有机磷含量。


需要的仪器,耗材:

1、可见分光光度计/酶标仪

2、台式离心机

3、可调式移液器

4、微量石英比色皿/96孔板

5、研钵、冰和蒸馏水。

6、550℃高温电炉

7、30-50目筛

8、100目筛


产品组成:

试剂名称规格保存条件
试剂R1液体×1 瓶2-8℃
试剂R2液体×1 瓶2-8℃
试剂R3液体×1 瓶2-8℃
标准品液体×1 支2-8℃


操作步骤:

一、样本处理:(具体比例可以参考文献)

1.无机磷

称取通过30-50 目筛子的风干土样0.01g,转移到1mL 离心管,加入1mL 试剂R1,震荡混匀,然后置于45℃水浴1h,8000rpm,离心10min,取上清液一,用于无机磷含量测定。

2.总磷提取

取通过100 目筛子的风干土样,550℃灼烧1h,冷却后称取约0.01g,转移到1 mL 离心管,加入1mL 试剂R1,震荡混匀,然后置于45℃水浴1h,8000rpm,离心10min,取上清液二,用于总磷含量测定。

二、试剂准备

1、试剂R3

临用前配制,加入8 mL 蒸馏水,充分溶解后加入4 mL 试剂R2,混匀;配好的溶液应为浅黄色。若变色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,该试剂应现配现用。

2、标准品

40 μg/mL 无机磷标准品。

注意:实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者

增加样本量进行检测。

三、测定步骤

1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长到660nm,蒸馏水调零。

2、打开水浴锅,调节温度到40℃。

3、空白管

取EP管,依次加入100μL蒸馏水,100μL试剂R3,混匀后置于40℃水浴保温10min,室温冷却10min后于660nm测定吸光度,记为A空白管。空白管只需做1-2次。

4、标准管

取EP管,依次加入10μL标准液,90μL蒸馏水,100μL试剂R3,混匀后置于40℃水浴保温10min,室温冷却10min后于660nm测定吸光度,记为A标准管。标准管只需做1-2次。

5、测定管

取EP管,依次加入10μL上清液一或者上清液二,90μL蒸馏水,100μL试剂R3,混匀后置于40℃水浴保温10min,室温冷却10min后于660nm测定吸光度,记为A测定管。

四、土壤磷含量计算

1. 土壤无机磷含量(μg/g 土样)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总÷W

W:土壤样本质量,g;

V总:上清液一总体积,1mL。

2. 土壤总磷含量(μg/g 土样)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总÷W

W:土壤样本质量,g;

V总:上清液二总体积,1mL。

3. 土壤有机磷(μg/g 土样)=土壤总磷-土壤无机磷


注意事项:

1、试剂R3配制过程中,可能会产生黑色固体,其不影响结果,注意吸取时不要将黑色固体吸入。

2、如果吸光值大于1时,样本需用蒸馏水做相应稀释。

3、空白管和标准管只需测定1-2次。

4、需在40min内完成比色。


本试剂盒仅供科研使用!


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