HK21501-96S 土壤中性磷酸酶(S-NP)测试盒(酶标板法)_上海惠诚生物生物试剂,标准品,仪器设备,耗材,一站式服务

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Cat. Number

HK21501-96S

Chemical Name

HK21501-96S 土壤中性磷酸酶(S-NP)测试盒(酶标板法)

Qty 1

100T/96S

References

土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH 显著影响，根据最适pH 范围，通常分为酸性、中性和碱性三种类型。

测定原理：

中性环境中，S-NP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出S-NP 活性。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水、乙醇、30~50 目筛和甲苯。

产品组成：

时间名称	规格	保存条件
试剂R1	液体×1 瓶	2-8℃
试剂R2	粉剂×1 瓶	2-8℃
试剂R3	液体×1 瓶	2-8℃
试剂R4	粉剂×2 支	2-8℃
标准品	液体×1 支	2-8℃

实验步骤：

注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1. 新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50 目筛。

2. 称取风干混匀土壤约0.1g，加入0.05mL 甲苯（自备），轻摇15min；然后再加入0.4mL 试剂R1并且充分摇匀，置于37℃恒温培养箱，开始计时，催化反应24h；到时后取出并迅速加入1mL 试剂R2，充分混匀，以终止酶催化的反应。10000rpm，25℃离心10min，取上清液置于冰上待测。

二、试剂准备

1、试剂R2：临用前加入100mL 蒸馏水充分溶解，2-8℃保存8 周；

2、试剂R4：临用前加入576μL 无水乙醇（自备），24μL 蒸馏水充分溶解，试剂变褐色后不能再使用，2-8℃可保存2 周（为延长试剂盒使用效期，故多给一瓶）；

3、标准品：0.5μmol/mL 苯酚标准液。

三、测定步骤

1. 可见分光光度计/酶标仪预热30min 以上，调节波长到660nm，分光光度计用蒸馏水调零。

2. 操作表：在微量玻璃比色皿/96 孔板中依次加入

试剂名称(uL)	空白管	标准管	测定管
样本	-	-	10
标准溶液	-	10	-
试剂R1	10	-	-
试剂R3	40	40	40
试剂R4	4	4	4
显色后再加蒸馏水
蒸馏水	146	146	146
混匀后室温静置30min，于660nm 测定吸光度，记为A 空白管，A 标准管，A 测定管。注：空白管和标准管只需要测定1-2 次。