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| Cat. Number | HK21497-48S |
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| Chemical Name | HK21497-48S 土壤蔗糖酶(S-SC)测试盒(酶标板法) |
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| Qty 1 |
100T/48S |
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| References | 蔗糖酶S-SC 能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收，其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量，微生物数
量及土壤呼吸强度密切关，是评价土壤肥力的重要指标。 检测原理： 蔗糖酶S-SC 催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在 540nm 有特征光吸收，在一定范围内540nm光吸收增加速率与 S-SC 活性成正比。 需要的仪器，耗材: 1、可见分光光度计/酶标仪 2、台式离心机 3、可调式移液器 4、微量石英比色皿/96孔板 5、研钵、冰和蒸馏水 6、30-50目筛 产品组成：
实验步骤： 一、样本处理（具体比例可以参考文献） 新鲜土样自然风干或37 度烘箱风干，研磨，过30-50 目筛。 二、试剂准备 1、试剂一：自备甲苯； 2、试剂三：临用前取1 瓶加入11 mL 蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂2-8℃保存2 周； 3、标准品：含10 mg 无水葡萄糖（干燥失重<0.2%）。临用前加入1 mL 蒸馏水溶解备用，2-8℃可保存2 周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。 三、测定步骤 1. 分光光度计/酶标仪预热30min 以上，调节波长至540nm，分光光度计蒸馏水调零。 2. 标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至0.5、0.4、0.3、0.2、0.1mg/mL，可参考下表。
备注：实验中每个标准管需85μL 标准溶液。 3. 加样表如下：
充分混匀，放入沸水浴中煮沸5min（盖紧，缠封口膜以防止水分散失），流水冷却后充分混匀。 取200μL 至微量玻璃比色皿或96 孔板中，测定吸光值A，分别记为A 测定管、A 对照管、A 标准管、A 空白管。计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管（每个测定管需设一个对照管），ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。标准曲线和空白管只需测1-2 次。 三、S-SC 活性计算 1、标准曲线的建立： 根据标准管的浓度（x，mg/mL）和吸光度ΔA 标准（y，ΔA 标准），建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA测定（y，ΔA 测定）带入公式计算样本浓度（x，mg/mL）。 2、S-SC 活性计算： 单位的定义：37℃，每天每g 土样中产生1mg 还原糖定义为一个S-SC 活力单位。 S-SC 活力（U/g 土样）= x×10×V 反总÷W÷T 10：稀释倍数； T：反应时间，1d； V 反总：反应体系总体积； W：样本质量，0.03g。 注意： 实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 本试剂盒仅供科研使用! |
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