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Cat. Number
HK21495-96S
Chemical Name
HK21495-96S 土壤有效硼测试盒(酶标板法)
Qty 1
100T/96S
References

硼是植物正常发育不可缺少的微量元素,能够促进植物生长茂盛和生殖器官的正常发育。根据土壤有效磷含量,合理供给硼元素是提高作物产量和品质的关键措施之一。


测定原理:  

硼与甲亚胺在弱酸条件下形成棕黄色配合物,在420nm 有特征吸收峰,即可计算土壤有效硼含量。



需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96 孔板、可调式移液枪、研钵、冰、蒸馏水、30-50 目筛。


产品组成:

试剂名称规格保存条件
试剂R1液体×1瓶2-8℃
试剂R2粉剂×1瓶2-8℃
试剂R3粉剂×2瓶2-8℃
试剂R4液体×1瓶2-8℃
试剂R5粉剂×2瓶2-8℃
标准品粉剂×1支2-8℃


实验步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可参考文献)

1、新鲜土样自然风干或37℃烘箱烘干,过30-50目筛。

2、按照土壤质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:5-10的比例(建议称取约0.2g土样,加入1mL蒸馏水)加入蒸馏水,沸水中浸提10min。

3、自然冷却至室温,加入50μL试剂R1,震荡5min。

4、加入100μL试剂R2,震荡3min。

5、加入100μL试剂R3,充分震荡褪去紫色。

6、8000g,25℃离心10min,取上清液待测。

二、试剂准备

1、试剂R2:临用前加入12mL 蒸馏水充分溶解备用,用不完的试剂可以2-8℃保存四周;

2、试剂R3:临用前取1 瓶加入6mL 蒸馏水充分溶解备用,用不完的试剂可以2-8℃保存一周;

3、试剂R5:临用前取1 瓶加入2mL 蒸馏水充分溶解,再加入0.5mL 试剂R3混匀,用不完的试剂可以2-8℃保存二周;

4、标准品:10mg 硼酸。临用前加入0.81mL 蒸馏水充分溶解,配制成200μmol/mL 标准溶液待用,用不完的试剂2-8℃可保存两周。

三、测定步骤

1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至420nm,分光光度计用蒸馏水调零。

2、标准液的稀释:将200μmol/mL标准液用蒸馏水倍比稀释至1.5、1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125μmol/mL的标准液备用。

备注:实验中需标准品40μL。

3、样本测定:

试剂名称(μL)空白管测定管标准管
样本
-40-
标准溶液--40
试剂R4808080
试剂R5404040
H2O804040
充分混匀,25℃黑暗中静置1h。于微量玻璃比色皿/96孔板中测定420nm处吸光值A,分别记为A空白管、A测定管和A标准管,计算ΔA测定=A测定管-A空白管,ΔA标准=A标准管-A空白管。标准曲线和空白管只需测1-2次。

四、土壤有效硼的计算

1、标准曲线的绘制:

以标准品的浓度为x 轴(x,μmol/mL),各个标准溶液对应的吸光度为y 轴(y,ΔA 标准),绘制标准曲线,建立标准方程y=kx+b,将ΔA(y,ΔA 测定)带入方程得到x(μmol/mL)。

2、土壤有效硼计算:

有效硼含量(mg/kg 土样)=10.81×x×V 样总÷1000÷(W÷1000)

W:样本质量,g;

V 样总:样本总体积;

10.81:硼分子量,10.81μg/μmol;

1000:单位换算系数,1mmol=1000μmol,1kg=1000g。


注意事项:

1、显色时严格控制温度并且避光,以免显色剂见光分解。

2、如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。


本试剂盒仅供科研使用!

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