HK21470-24S 土壤酸性蛋白酶测试盒(可见分光光度法)_上海惠诚生物生物试剂,标准品,仪器设备,耗材,一站式服务

服务热线：13917250134「同微信」

您的位置：首页>>分析化学>>试剂盒>>HK21470-24S 土壤酸性蛋白酶测试盒(可见分光光度法)

产品中心

/ Products Classification 点击展开+

Cat. Number

HK21470-24S

Chemical Name

HK21470-24S 土壤酸性蛋白酶测试盒(可见分光光度法)

Qty 1

50T/24S

References

土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。S-ACPT在酸性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。

测定原理：
酸性条件下，S-ACPT可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在680nm有特征吸收峰。

需要的仪器，耗材:

1、可见分光光度计

2、台式离心机

3、可调式移液器

4、玻璃比色皿

5、研钵、冰和蒸馏水。

6、研钵/匀浆器

7、水浴锅

8、磁力搅拌器

9、1.5 mL EP 管

产品组成：

实验步骤：

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理（具体比例可以参考文献）

新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50 目筛。

二、试剂准备

1、试剂R2：临用前加入10mL R6，沸水浴中搅拌溶解。

2、标准品：20μmol/mL 标准酪氨酸。

三、测定步骤

1、分光光度计预热30min以上，调节波长至680nm，蒸馏水调零。

2、取10μL 20μmol/mL酪氨酸标准液，加入990μL蒸馏水，充分混匀，配制成0.2μmol/mL标准液使用，现用现配。（实验中每管需要220μL，为减小实验误差，故配制大体积。）

3、样本测定

1.5mLEP管中分别加入下列试剂：

试剂名称（μL）	测定管	对照管	标准管	空白管
风干土样(g)	0.1	0.1	-	-
试剂R1	200	200	-	-
试剂R2	100	-	-	-
充分混匀后，37℃水浴/恒温培养箱中反应24h，期间振荡5-6 次，使土样与反应液充分接触。			-	-
试剂R3	200	200	-	-
试剂R2	-	100	-	-
混匀，10000rpm 室温离心10min，取上清液待测			-	-
上清	220	220	-	-
标准液	-	-	220	-
蒸馏水	-	-	-	220
试剂R4	650	650	650	650
试剂R5	130	130	130	130
混匀，40℃水浴或恒温培养箱培养10min，10000rpm 室温离心10min，取上清液于680nm 下读取各管吸光值A，分别记为A 测定管、A 对照管、A 标准管、A 空白管，计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管，ΔA标准=A 标准管-A 空白管。（标准管、空白管只需测1-2 次，每个测定管需设一个对照管）